培养基灭菌的学习资料.pptxVIP

培养基灭菌的学习资料第1页/共104页第2页/共104页 第二章 培养基灭菌教学时数：4学时教学目的与要求：了解灭菌的概念及必要性，掌握灭菌方法、湿热灭菌的原理、微生物的热死动力学、影响培养基灭菌的因素，以达到在工业生产上能进行简单的灭菌操作，并且能应用该理论解决简单的实际问题。 第3页/共104页教学重点：微生物的热死动力学、影响培养基灭菌的因素、分批灭菌设计、连续灭菌设计教学难点：分批灭菌设计、连续灭菌设计第4页/共104页 绝大多数的发酵过程需要在无菌条件下进行，因此培养基的灭菌必须合理的设计，使之既能达到所需的无菌程度，又能保证培养基中有效成分的破坏在允许的围之内,培养基的优劣直接关系到实验和研究的成败与否及微生物发酵生产的效率。问题：什么是培养基？第5页/共104页本章主要内容1. 灭菌的概念和必要性2. 灭菌的方法3. 湿热灭菌的原理4. 培养基在工程上要解决的课题5. 微生物的热死动力学6. 影响培养基灭菌的因素7. 分批灭菌设计8. 连续灭菌设计第6页/共104页一.灭菌的概念和必要性灭菌：是指用物理或化学因子杀灭有生活能力的细菌营养体和芽孢或孢子的方法。消毒：消除病原微生物的措施。在工业中一般都笼统地称为杀菌或灭菌。第7页/共104页灭菌的意义： 微生物是无孔不入、无处不在的，但在自然界却很难找到纯培养状态下生长的微生物。自从发酵工业利用纯培养技术以来，许多发酵过程特别是氨基酸等新型发酵工业都要求纯种培养，即在培养期间除大量繁殖生产菌外，不允许其他微生物存在（通常称之为杂菌）。第8页/共104页如有杂菌，可引起以下的后果：①生产菌和杂菌同时在培养基中生长，结果丧失了生产能力。②杂菌的生长速度有时比生产菌生长得快，结果使反应器中以杂菌为主。③杂菌会污染最终产品。第9页/共104页④杂菌所产生的物质，使提取产物时发生困难。⑤杂菌降解所需要的产物。⑥发酵如污染了噬菌体，可使生产菌株发生溶菌 现象。第10页/共104页工程上灭菌：是指使用物理或化学方法将培 养基中的杂菌的细胞和孢子杀灭至不影响发酵为限。灭菌是为了保证进行纯培养（纯种）发酵。第11页/共104页第12页/共104页第13页/共104页二. 灭菌的方法(所有的灭菌，不全针对培养基） 微生物细胞是由蛋白质组成，加热可导致蛋白质变性，从而达到消灭微生物的目的。微生物对高温的敏感性大于对低温的敏感性，所以采用高温灭菌是一种有效的灭菌方法。细胞内蛋白质的凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内的含水量越大，蛋白质凝固越快。第14页/共104页1、湿热灭菌 根据被灭菌物品的不同，选择各种不同温度的蒸汽进行灭菌，是工业上常用的灭菌方法。湿热灭菌简便、有效、经济。第15页/共104页（1）煮沸法：煮沸100℃，5分钟，能杀死一般细菌的繁殖体。许多芽胞需经煮沸5～6小时才死亡。水中加入2%碳酸钠，可提高其沸点105℃，既可促进芽胞的杀灭，又能防止金属器皿生锈。煮沸法可用于饮水和一般器械（刀剪、注射器等）的消毒。　第16页/共104页（2）流通蒸汽灭菌法：利用100℃左右的水蒸汽进行消毒，一般采用流通蒸汽灭菌器（其原理相当于我国的蒸笼），加热15-39min，可杀死细菌繁殖体。消毒物品的包装不宜过大、过紧以利于蒸汽穿透。第17页/共104页（3）间歇灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽，以达到灭菌的目的。一般用流通蒸汽灭菌器，100℃加热15～30min，可杀死其中的繁殖体；但芽胞尚有残存。取出后放37℃孵箱过夜，使芽胞发育成繁殖体，次日再蒸一次，如此连续三次以上。本法适用于不耐高温的营养物（如血清培养基）的灭菌。 第18页/共104页（4）巴氏消毒法（Pasteurization）：利用热力杀死液体中的病原菌或一般的杂菌，同时不致严重损害其质量的消耗方法。由巴斯德创用以消毒酒精类，故名。加温61.1～62.8℃ 30min，或71.7℃ 15～30s。常用于消毒牛奶和酒类等。第19页/共104页（5）高压蒸汽灭菌法：压力蒸汽灭菌是在专门的压力蒸汽灭菌器中进行的，是热力灭菌中使用最普遍、效果最可靠的一种方法。其优点是穿透力强，灭菌效果可靠，能杀灭所有微生物。 目前使用的压力灭菌器可分为两类：下排气式压力灭菌器和预真空压力灭菌器，适用于耐高温、耐水物品的灭菌。第20页/共104页2、干热灭菌　干热灭菌比湿热灭菌需要更高的温度与较长的时间。（1）干烤：利用干烤箱，加热160～180℃2小时，可杀死一切微生物，包括芽胞菌。主要用于玻璃器皿、瓷器等的灭菌。 第21页/共104页（2）烧灼和焚烧：烧灼是直接用火焰杀死微生物，适用于微生物实验室的接种针等不怕热的金属器材的灭菌。焚烧是彻底的消毒方法，但只限于处理废弃的污染物品，如无用的衣物、纸张、垃圾等。焚烧应在专用的