生物物质分离与纯化.pptxVIP

生物物质分离与纯化;;9.1概述;Separation Processes: ;来说，（如抗生素、乙醇、柠檬酸等生产), 分离和提纯部分费用占总投资的60%，而对基因工程菌的发酵占到90%，对其下功夫研究和设计是一项十分重要和有意义的工作。;下游加工过程应遵循的原则;第7页/共37页;下游加工一般工艺流程;一、发酵液的预处理;二、发酵液的固液分离;设备;;Disc-Centrifuges;第14页/共37页;Centrifuges;三、细胞破碎;压力破碎法：利用压力释放时的固液剪切进行破碎。操作简单，可连续操作，适用面广，但操作会产生热，需有冷却系统，同时破碎率低。;碱或酶处理法：利用碱或酶的处理是细胞壁或膜破坏，产物得以释放。该法简单，可规模化生产，但适用面窄。;Cell disruption equipment;第20页/共37页;四、分离和纯化;Extractors;3. 双水相萃取； 二种互不溶的聚合物，这两种的聚合物中的含水率很高，一般在70-90%，这样就可以防止在有机相中的变性，同时这些高聚物含有保护和稳定蛋白质等生物活性物质的作用。;4. 反胶团萃取； 在有机相中加入一定量的表面活性剂，形成大小为毫微米级的微胶团。当此有机相与含有目的产物的水相形成液-液萃取时，由于微胶团中的表面活性剂带有与水相中的蛋白质相反的电荷，而将水相中的蛋白质迁移入微团内水池中，实现物质的提取。;Supercritical Fluid Extraction;6; 固体吸附： 是物质从液相（发酵液）到固相（吸附剂）发生物质的转移。此法用于蛋白质、核酸、氨基酸、抗生素等物质的分离和提取。 按照吸附剂的作用原理：分为三大类。 A物理吸附： 依靠范德华力的作用。吸附剂可用活性炭、硅藻土、硅胶、分子筛和氧化铝等。 B静电吸附： 借助静电引力吸附物质。主要为合成的树脂。 C: 亲和吸附： 在树脂上嫁接一个能与要分离的物质发生特异性反应的配基。 ;五、提纯;Column Chromatography;Ion Exchange;Gel Filtration;Affinity Chromatography;2：沉淀法 适合大规模生产，通过采取不同的手段使发酵液中目的物质溶解度降低，使之发生沉淀，达到分离提纯的目的。 常用等电点沉淀法、盐析法、加热沉淀法、有机溶剂沉淀法等;4：电泳法 在电场的作用下发生的带电粒子定向运动，其移动的速度受到物质所带电荷多少而不同，依据此而进行分离纯化的方法。;SDS PAGE of Purification;六、最后加工 包括结晶和干燥;第36页/共37页;感谢您的欣赏