耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的药物敏感性及耐药机制研究.docxVIP

耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌的药物敏感性及耐药机制研究 铜绿假单胞菌（pae）是医院感染的重要条件。亚胺培南、美罗培南等碳青霉烯类抗菌药物是目前临床上治疗多药耐药铜绿假单胞菌感染疗效最可靠的抗菌药物 1 材料和方法 1.1 患者的各类临床检疫标本 2009年1-8月从南华大学附属第一医院门诊和住院患者的各类临床送检标本中共分离到无重复病原菌946株,其中耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌75株。标准菌株:铜绿假单胞菌ATCC27853,购自卫生部临床检验中心。 1.2 识别菌株 按临床微生物学操作规程对标本接种培养,用BD公司CRYSTRL微生物全自动鉴定仪作菌株鉴定。 1.3 药物过敏试验 采用两倍琼脂稀释法,按美国临床实验室标准化委员会(2002年版)标准进行,测定抗菌药物对铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC)。 1.4 模板-20制备 采用重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)进行耐药菌株的DNA分型,细菌DNA的提取:从平板上挑取单个菌落于2ml LB肉汤培养基中,35℃培养至对数生长期,取培养物1ml,14 000r/min离心15min,弃上清液,沉淀物加入100μl标本裂解液,充分混匀后100℃煮沸15min,14 000r/min离心5 min,取上清液作为模板-20℃保存备用。引物:ERIC1:5′-ATGTA-AGCTCCTGGGGATTCAC-3′,ERIC2:5′-A