北大植物生物学实验指导20附录一：光学显微镜的使用与维护.pdfVIP

附录 1. 光学显微镜的使用与维护 附录 1. 光学显微镜的使用与维护 光学显微镜是生物科学研究的重要工具，也是植物生物学实验教学过程中最常用的工具。 光学显微镜通过特殊的光学成像原理把被观察的物体放大几百倍甚至上千倍，从而使我们能 够对一些微小的生物以及生物体的很多细微结构进行仔细的观察。从事生物学研究，必须了 解光学显微镜的基本构造和性能，并掌握正确的使用方法。 1. 光学显微镜的构造 普通光学显微镜由光学部分和机械部分两部分组成。光学部分包括：物镜、目镜、聚光 器和反光镜等；机械部分包括：镜台、镜座、镜头转换器、粗调节器和细调节器等。 附图 1.1 物镜是显微镜中最重要的光学部件，它决定显微镜像的质量、分辨力和放大倍数。物镜 都安装在物镜转换器上，普通有低倍镜（4×，10×）、高倍镜（40×，45×）和油镜（90×， 95×，100×）三种。使用低倍镜和高倍镜时，物镜与标本间的介质是空气，使用油镜时，物 镜与标本间的介质是香柏油或液体石蜡。 目镜位于镜筒的上方，它的功能是将物镜形成的中间像进一步放大，使之便于观察，但 它并不能提高显微镜的分辨力。 聚光器装在镜台下，其作用是将光线聚焦于标本之上，增强照明度。聚光器内部有孔径 光栏可以调节开口的大小，且聚光器本身可以升降。 反光镜是普通显微镜的取光设备，一面是凹镜，一面是平镜，镜体可在弧弓上自由翻转 以调整位置，使光线射向聚光器。现代很多类型显微镜更多地采用人工光源，即内置式灯光 照明，因此不再需要反光镜。 镜台（载物台）是放置标本的地方，镜台上有压片夹用以固定标本。现代显微镜多采用 推进尺固定标本，并可使标本前、后、左、右移动。 粗调节器和细调节器能使镜筒或镜台升降，用于调节物镜与标本的距离，以得到最清晰 的图像（调焦）。现代显微镜粗细调节器多采用共轴式，在轴上有锁环。 观察时，制片放在镜台上，由反光镜反射、并经聚光器集中的光线透过制片，将制片上 的结构在物镜中产生放大的倒的实像，此像落在目镜的焦距内，又为目镜放大，这样，眼睛 最终看到的是放大的倒的虚像。 显微镜的放大倍数由目镜、物镜和镜筒长度共同决定，镜筒长度一般为 160mm（少有 170mm），物镜和目镜上则直接刻有放大的倍数，物体最后被放大的倍数为目镜放大倍数与物 镜放大倍数的乘积。如：物镜是 40×，目镜是 10×，则物体最后放大倍数是 40×10＝400×。 2. 显微镜的使用步骤 (1) 把显微镜放在桌上，稍偏向身体的左方，离桌子边缘约 3 厘米的位置，右侧放记录 本或绘图纸等。 (2) 在使用显微镜观察切片前，首先要调节好光源。在实验室中可利用灯光或自然光， 但不能利用直射的太阳光，以免损伤眼睛及制片。 为了迅速而正确地对光，先用低倍镜(这里指的是 10×物镜)，开大光圈，在目镜上观察 附录 1. 光学显微镜的使用与维护 和转动反光镜，寻找最光亮的部分，同时必须使整个视野（就是在显微镜中所能看到的范围） 的光线均匀。如果靠近灯光，可取凹面的反光镜，如果离光源较远，可用平面的反光镜。 (3) 把制片（切片）放在显微镜的镜台上，把需要观察的部分移到物镜下面，然后用压 片夹压紧。 (4) 通过目镜进行观察，观察时应睁开双眼，用左眼看目镜。 (5) 在开始观察时，为避免物镜压坏制片，可以先从侧面注视物镜与制片间的距离，同 时逐渐降落镜筒，使之靠近盖玻片，然后通过目镜观察，慢慢转动粗调节器，使镜筒逐渐上 升，直到看清制片中的影像为止。 (6) 需要观察制片中某一部分的细微结构时，可先在低倍镜下找到最合适的地方，并将 其移到视野的中央，然后转动镜头转换器，转用高倍镜(40×)观察。当换到高倍镜后，应该 就可以看到制片中的影像，如果不太清楚，可以转动细调节器使影像清晰可见。 (7) 需要用油镜观察时，要先将物镜移开，在要观察的部位加一滴香柏油或液体石蜡， 然后将油镜放正，并慢慢转动粗调节器，降下镜筒，使镜头浸入油滴中。可下降至几乎与制 片接触，但切不可压及制片，以免损坏镜头。然后，用左眼在目镜上观察，向上微微转动粗 调节器，使镜筒上升，当视野中出现有模糊的影像时，