人教版高中生物选修3专题1基因工程DNA重组技术的基本工具教学课件.pptxVIP

一、基因工程的概念;二、DNA重组技术的基本工具;前者是限制酶在它识别序列的______________将DNA的两条链切开产生的，后者是限制酶在它识别序列的____________切开产生的。 ;2．DNA连接酶——“分子缝合针”。 (1)作用：将______________“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的______________，形成重组DNA分子。 (2)种类。 ①E·coli DNA连接酶：只能缝合DNA片段的____________。;②T4DNA连接酶：既可缝合DNA片段的黏性末端，又可缝合DNA片段的________，但连接后者的效率________。 3．运载体——“分子运输车”。 (1)作用：携带__________进入受体细胞。 (2)种类：质粒、__________的衍生物、动植物病毒等。;①能够在受体细胞中进行__________，或整合到____________上，随染色体DNA进行同步复制。 ②有一个至多个__________切割位点，供外源基因插入。 ③具有特殊的________________，供重组DNA的鉴定和选择。;;一、目的基因的获取; 凡是编码阻遏或激活结构基因转录的蛋白质的基因都称为调节基因。;;（1）基因文库的概念;;;;;;基因组DNA文库;;;;;;;;;;;;;;;;;理想拷贝数=2n n 循环次数 实际拷贝数=(1+x)n X 平均效率,约为0.85 n 循环次数 ;;;;;;;;;;;;;; 是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的细胞筛选出来。;①载体与表达载体的区别：二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构。;常用的受体细胞：;（二）方法;;;;;;Ti质粒;③转化过程:;; 利用农杆菌对植物进行转化，首先将目的基因插入到Ti质粒衍生的转化载体上，形成重组DNA，然后将重组DNA转入含有Vir致病基因的农杆菌，再通过上述农杆菌侵染植物外植体。;; 要选择合适的农杆菌菌株，因为不是所有的农杆菌菌株都可以侵染单子叶植物。 要加趋化和诱导的物质，一般为乙酰丁香酮等，目的是使农杆菌向植物组织的受伤部位靠拢（趋化性）和激活农杆菌的Vir区（诱导性）的基因，使T-DNA转移并插入到染色体DNA上。;④优点; C.农杆菌Ti质粒转化系统转化的外源基因以单拷贝为多数，遗传稳定性好，并且多数符合孟德尔遗传规律，因此转基因植株能较好地为育种提供了中间选育材料；;; 将直径4um的钨粉或金粉在供体DNA中浸泡，然后用基因枪将这些粒子打入细胞、组织或器官中，具有一次处理多个细胞的优点，但转化效率较低。另外这种方法也用于基因治疗和抗体制备，并已取得初步成效。;;;;;（2）操作程序;;;;;;;受体生物;小结;;;; 是由微生物（包括细菌、真菌、放线菌属）或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类次级代谢产物，能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。 以前被称为抗菌素，事实上它不仅能杀灭细菌而且对霉菌、支原体、衣原体、螺旋体、立克次氏体等其它致病微生物也有良好的抑制和杀灭作用，通常将抗菌素改称为抗生素。; 从放线菌金色链丛菌的培养液等分离出来的抗菌物质，对革兰氏阳性菌、阴性菌、立克次体、滤过性病毒、螺旋体属乃至原虫类都有很好的抑制作用，对结核菌、变形菌等则无效。;;四环素 抗性基因;;;;;;;;;;;;;;;;;（二）基因治疗;（二）基因治疗;病例;②治疗方法：;;;