中药保湿抗衰组合物的配比研究.docxVIP

中药保湿抗衰组合物的配比研究 皮肤是人体最大的器官。完整的皮肤屏障结构和功能不仅对维持10%20%的正常皮肤含水量非常重要，而且还可以形成第一个完整的防外部机械、化学、物理和生物刺激的皮肤损伤。 现代科学研究表明,玫瑰、铁皮石斛、芦荟、银耳等含有丰富的黄酮类、氨基酸类、多糖类成分,因此具有良好的保湿抗氧化功效 1 实验部分 1.1 试剂:-二苯基-2-三硝基苯 玫瑰花干花、银耳、铁皮石斛、芦荟干片:市售;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼,98%:阿拉丁试剂有限公司;邻苯三酚、分析纯:阿拉丁试剂有限公司;盐酸、分析纯:广州精科生物科技有限公司;硫酸亚铁(FeSO 1.2 超声辅助提取 按配比称取玫瑰花、银耳、铁皮石斛、芦荟干片共10 g,混合后粉碎,得到药材混合物;将药材混合物置于圆底烧瓶中,加入15倍量的乙醇溶液,在水浴回流条件下连续超声(超声功率90 W)辅助提取1～3次,每次45～90 min,过滤得到粗提取液;将粗提取液在70℃条件下减压蒸馏浓缩至10 mL,将上述浓缩液经D101型大孔树脂柱纯化以除去会对后续应用产生不利影响的无机盐类等物质,用乙醇溶液洗脱,收集洗脱液;在55℃条件下减压蒸馏至10 mL,得到中药保湿抗衰组合物提取物。 1.3 银耳多糖的功能 根据中药君臣佐使组方原理将四味中药配伍运用,以玫瑰为君药,玫瑰具有良好的保湿、抗氧化效果;以铁皮石斛为臣药,铁皮石斛富含石斛多糖、氨基酸等成分,滋润肌肤和抵抗衰老;以芦荟为佐药,缓解皮肤干燥、延缓肌肤衰老;以银耳为使药,银耳的主要成分为银耳多糖,是一种植物源性高效保湿剂,分子量达到100～130万,并且分子中富含大量的极性基团例如羟基、羧基等,这些基团容易与水分子形成氢键,从而结合大量的水分,银耳多糖分子间以网状结构的形式相互交织,于此同时与水分子中的氢结合,从而呈现出强大的保湿锁水能力和比较高效的保湿功效。通过研究不同中药组分配比对组合物抗氧化功效的影响筛选最佳中药组分配比。具体实验设计见表1。药物准备及提取方法见1.2。 1.4 提取条件的确定 组合物的提取效果受提取过程中各因素的影响,其中提取溶剂、提取时间以及提取次数等因素对提取效果的影响较大,因此笔者以提取过程中的乙醇浓度(A/%)、提取时间(B/min)、提取次数(C/次)为考察对象,以提取物的超氧阴离子自由基清除能力和羟自由基清除能力为综合考虑指标,选用L9 (3 1.5 抗癫痫效果评价 1.5.1 邻苯三酚用量的测定 取0.05 mol/L pH 8.2的Tris-HCl缓冲溶液4.5 mL,于25℃水浴锅中预热30 min。再加入1 mL样品溶液和0.4 mL 25 mol/L的邻苯三酚溶液,混匀后,于25℃水浴中反应5 min,加入1 mL 8 mol/L的HCl终止反应。以Tris-HCl缓冲溶液作参比,在299 nm处测吸光度值。空白对照组用1 mL样品溶液的溶剂来替代样品溶液。 超氧阴离子自由基清除率的计算公式如式(1)所示: 式(1)中,A 1.5.2 羟基自由基去除能力评价试验 在25 mL比色皿中依次加入2 mmol/L FeSO 羟自由基清除率的计算公式如式(2)所示: 式(2)中,A 1.6 中药保湿剂的制备 配方组成见表3。将添加相原料羟苯甲酯和羟苯丙酯预先在丁二醇中加热溶解至澄清透明,备用;将水相原料投入至去离子水中,加热至75～85℃,搅拌至溶解均匀;保温10 min,水相降温至60℃,边搅拌边缓慢加入已预先在丁二醇中溶解好的羟苯甲酯和羟苯丙酯,搅拌至溶解均匀;冷却至40℃,加入中药保湿抗衰组合物,搅拌均匀,即得保湿抗衰精华液待测样。将配方中的中药保湿抗衰组合物以去离子水代替,按照相同的方法制得保湿抗衰精华液对照样。 1.7 皮肤的干燥性和抗衰竭试验 1.7.1 受试志愿者选择 皮肤水分含量及皮肤水分流失(TEWL)试验,水分测试采用的是世界公认的CORNEOMETER?法——电容法,皮肤水分流失(TEWL)对于皮肤角质层功能的评估是一个非常重要的参数,在国际上已经得到了非常广泛的认可 测试方法具体为: 选取干性肌肤志愿者(刺痛感累计≥3分者)20名,年龄控制在20～45岁,男女比例各50%。要求受试志愿者受试部位在测试前15天不能使用任何产品(化妆品、外用药品、内服保健品)。试验前,要求受试志愿者对面部进行清洗并在清洗后2 h进入气候控制室(22±1℃,相对湿度50%)静坐20 min以上,并保持放松状态。 试验中按随机表进行半边脸测试,一侧为样品,另一侧为对照,选取志愿者的左右鼻唇沟部分进行皮肤水分含量及水分流失(TEWL)测试,取3个值的平均值作为左右鼻唇沟水分含量数据(d0)及鼻唇沟皮肤水分流失(TEWL)的数据(d0)。测试结束后,志愿者需按要求使用,一侧脸涂抹样