回顾Agilent高效液相色谱仪(侯)（汇总）.pptVIP

Agilent1260高效液相色谱仪操作及本卷须知培训是为了共同提高 目录 仪器原理液相色谱法就是同一时刻进入色谱柱中的各组分，由于在流动相和固定相之间溶解、吸附、渗透或离子交换等作用的不同，随流动相在色谱柱中运行时，在两相间进展反复屡次地分配过程，使得原来分配系数具有微小差异的各组分，产生了保存能力明显差异的效果，进而各组分在色谱柱中的移动速度就不同，彼此别离开来，最后按顺序流出色谱柱而进入信号检测器，在记录仪上或色谱数据机上显示出各组分的色谱行为和谱峰数值.根据各组分在色谱图上的保存时间〔或保存距离〕，可直接进展组分的定性；根据各组分峰面积的大小，即可作为定量测定的参数，采用工作曲线法〔即外标法〕测定相应组分的含量. 仪器组成 操作步骤 操作步骤一、仪器使用前确认：使用前必须检查仪器是否校准合格并在有效期内，查看设备使用记录，核实前一次的使用是否有异常情况.有异常情况不允许直接使用，必须第一时间向质量控制科主管进展汇报，确认无误前方可使用.二、在开机之前，根据所做样品的方法要求，准备好所用流动相，标样及样品.流动相抽滤后超声脱气15分钟，标样和样品经孔径为0.45m的滤膜过滤.三、翻开主机各模块电源〔从上至下〕，待各模块完成自检后，再双击桌面“HPLC1260联机〞图标,化学工作站自动与仪器建立通讯. 操作步骤四、从“视图〞菜单中选择“方法和运行控制〞画面, 点击“视图〞菜单中的“显示顶部工具栏〞，“ 显示状态工具栏〞，“系统视图〞,“样品视图〞，使其命令前有“√〞标志，来调用所需的界面.五、排空操作：旋开排气阀〔逆时针〕，单击“四元泵〞图标出现快捷键，点击“方法〞选项进入泵编辑画面.将泵流量设到5ml/min，溶剂A设到100%，翻开泵，排出管线中的气体2～3分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力〔假设大于10bar，那么应更换排气阀内过滤白头〕.依此切换到B、C、D溶剂分别排气.排气完毕后关闭排气阀〔顺时针旋转〕. 操作步骤六、方法编辑：1、从“方法〞菜单中选择“编辑完整方法…〞 项，如以以下图所示选中除“数据分析 〞外的三项，点击“确定〞，进入下一画面.2、方法信息：在“方法注释〞中参加方法的信息〔如：测试方法〕.点击 “确定〞， 进入下一画面.3、泵参数设定：在“流速〞处输入流量,如1ml/min，在“溶剂 B〞处输入80.0,(A=100-B-C-D) ,也可“插入 〞一行“时间表〞 ,编辑梯度.在“压力限〞处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子.点击“确定〞，进入下一画面. 操作步骤4、自动进样器参数设定: “标准进样〞----只能输入进样体积，此方式无洗针功能.“洗针进样〞----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针.“使用进样器程序〞---可以点击“编辑〞 按钮进展进样程序编辑.点击“确定〞，进入下一画面.5、柱温箱参数设定: 在“温度〞下面的空白方框内输入所需温度,如：40度.并选中它,点击“更多〞 键, 如以下图,选中“与左侧一样〞，使柱温箱的温度左右一致.点击“确定〞，进入下一画面. 操作步骤5、检测器参数设定: 在“波长〞下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm, 在“峰宽 (响应时间)〞下方点击下拉式箭头,选择适宜的响应时间, 如0.1min (2s).在“时间表〞 中可以“插入〞一行，输入随时间切换的波长，如1min ，波长=300nm.点击“确定〞，进入下一画面.6、在“ 运行时选项表 〞中选中“ 数据采集〞，点击“确定〞.7、点击“方法〞菜单，选中“方法另存为…〞，输入一方法名，如“测试〞，点击“确定〞. 操作步骤8、从菜单 “视图〞中选中“在线信号〞,选中“信号窗口1〞,然后点击“改变…〞 钮, 将所要绘图的信号移到右边的框中,点击“确定〞.(如同时检测二个信号,那么重复10,选中“信号窗口2〞.单击“改变〞键，即可弹出的“编辑信号图谱〞窗口，进而选择所需的谱图信号.9、点击“泵〞图标，点击“设置泵…选项〞，设流速：1.0ml/min.点击泵下面的瓶图标，〔以单元泵为例〕，输入溶剂的实际体积和瓶体积. 也可输入停泵的体积，点击“确定〞.10、把缓冲液换成流动相，待压力根本稳定后,翻开检测器灯，观察基线情况. 操作步骤11、数据分析方法编辑:从“视图〞菜单中，点击“数据分析〞进入数据分析画面.从“文件〞菜单项选择择“调用信号〞，选中您的数据文件名.点击“ 确定〞，那么数据被调出.做谱图优化：从“图形〞菜单中选择“信号选项〞.从“范围〞 中选择“满量程〞 或“自动量程〞 及适宜的时间范围或选择“自定义量程〞 调整.反复进展，直到图的比例适宜为止.点击“ 确定〞. 操作步骤12、积分:从“积分〞菜单中选择“积分事件〞选项，如以以下图所示.选择适