第三章基因工程载体演示文稿.pptVIP

酵母自主复制序列（ARS) 一段特殊的序列，含有酵母菌中 DNA 进行双向复制所必需的信号。 当前第26页\共有35页\编于星期三\8点 酵母着丝点 (CEN) 在 YAC 中起到保证一个细胞内只有一个人工染色体的作用。 pYAC4 ：酵母第四条染色体的着丝粒。 当前第27页\共有35页\编于星期三\8点 正常酵母人工染色体含有： *四膜虫端粒（tel） 定位于染色体末端一段序列，用于保护线状的 DNA 不被胞内的核酸酶降解，形成稳定的结构。 当前第28页\共有35页\编于星期三\8点 二、 ?YAC 载体的选择标记 主要采用营养缺陷型基因 TRP 1：色氨酸生物合成基因缺陷型URA 3：尿嘧啶生物合成基因缺陷型LEU 2：亮氨酸合成基因缺陷型 SUP 4：赭石突变抑制基因 当前第29页\共有35页\编于星期三\8点 克隆位点：位于sup4基因内 SuP4是一个赭石突变（UAA）抑制基因。 宿主酵母菌的胸腺嘧啶合成基因带有一个赭石突变 ade2。 在赭石突变宿主中，没有外源基因插入时，sup4基因抑制赭石突变，则形成正常白色菌落； 有外源基因插入时，sup4基因遭破坏，则形成红色菌落，十分容易挑选出有DNA插入片段的红色菌落，建成YAC文库。 当前第30页\共有35页\编于星期三\8点 YAC克隆DNA片段的过程是：