DB37_T 4048-2020猪肉中阿托品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法.pdf

ICS 67. 120. 10B 40DB37山長东省地電方标准DB37/T4048—2020猪肉中阿托品残留量的测定液相色谱-串联质谱法Determination of atropine residue in pork by high-performance liquidchromatography-tandem mass spectrometry2020-07-09发布2020-08-09实施山东省市场监督管理局发布 DB37/T 4048—2020前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由山东省畜牧兽医局提出并组织实施。本标准由山东省畜牧业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、五莲县畜牧兽医管理服务中心本标准主要起草人：季霞、邓立刚、李增梅、徐宁、陈璐、马新风。I DB37/T 4048—2020猪肉中阿托品残留量的测定液相色谱一串联质谱法1范围本标准规定了猪肉中阿托品残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于鲜冻猪肉中阿托品残留量的测定。本标准方法检出限为2μg/kg，定量限为5g/kg2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样中的阿托品经磷酸二氢钾缓冲溶液提取，混合阳离子固相萃取柱净化（PCX净化柱），液相色谱-串联质谱测定，外标法定量。4试剂或材料除非另有说明，仅使用分析纯试剂，水符合GB/T6682一级水的规定。4.1甲醇：色谱纯。4.2甲酸：色谱纯。4.3乙睛：色谱纯。4.4正已烷：色谱纯。4.5盐酸溶液（6mo1/L）：量取50mL浓盐酸，用水稀释，转移至100mlL容量瓶中，用水定容至刻度线，摇匀。4.6磷酸二氢钾缓冲溶液（0.1mo1/L）：称取磷酸二氢钾13.6g，加900mL水溶解，用盐酸溶液（4.5）调pH至4.0，转移至1000mL容量瓶中并定容至刻度线，摇匀。4.72%氨化甲醇溶液：取2mL氨水至100mL容量瓶，用甲醇定容，摇匀。4.8阿托品（分子式CAS：51-55-8）：纯度≥98%。4.9阿托品标准储备液：准确称取阿托品标准品0.01g（准确至0.00001g），用乙睛落解并定容至100mL，摇匀，配制成质量浓度为100mg/L标准储备液，避光-18保存，有效期1年。4.10阿托品标准中间：准确移取5mL阿托品标准储备液于50mL容量瓶中，用乙精定容，此时浓度为10mg/L的标准中间液，避光-18℃保存，有效期6个月。4.11固相萃取柱：混合阳离子交换同相萃取柱（PCX，150mg/6mL，或性能相当者）。4.12微孔滤膜：有机相，0.22μm。1 DB37/T 404820205仪器设备5. 1液相色谱一三重四级杆串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI源）。5. 2分析天平：感量0.01g和0.00001g。5. 3高速匀累机：转速不低于10000r/min。5. 4高速冷冻离心机：转速不低于10000r/min。5. 5pH 计。5. 6涡旋振荡器。5. 7氮吹仪。5. 8固相萃取装置。5. 9组织搅碎机。5. 10超声清洗机。6样品取适量新鲜或冷藏的猪肉样品，充分搅碎均匀，-18C以下保存。7测定步骤7.1提取称取平行试样5g（精确至0.01g）于50mL离心管中，加入磷酸二氢钾缓冲落液（4.6）20mL，加盖后涡旋摇勾，超声处理15min：4℃10000r/min离心5min，转移上清液到50ml离心管中。残渣中再次加入20mL缓冲溶液，重复提取一次，合并上清液，过滤，收集全部滤液于50mL容量瓶中，用缓冲溶液定容至50mL，待净化。7. 2净化依次用6mL甲醇、6mL水和6mL0.1%甲酸水溶液活化PCX固相萃取柱，准确移取5mL提取液以小于1mL/min的流速过固相萃取柱，再依次用6mL0.1%甲酸水溶液、6mL甲醇、6mL正已烷淋洗，弃去淋洗液，抽干，最后用5mL2%氨化甲醇（4.7）洗脱，收集洗脱液，40℃水浴氮吹至近干，准确加入1mL0.1%甲酸水溶液复溶，混匀，过滤膜，用于测定。7.3测定7. 3. 1仪器参考条件液相色谱参考条件如下：a)色谱柱：Cis色谱柱，柱长100m，柱内径2.1m，颗粒内径1.7μm，或性能相当者：b) 流动相：0.1%甲酸水落液（A相），甲醇（B相）：c)流速： 0.3 mL/min;d)柱温：40C：e)进样体积：2.0μL;f)流动相梯度洗脱条件见表1。2 DB37/T 4048—2020表1流动相梯度洗脱程序时间流动相A流动相Bnin%%0. 09010 0. 590