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- 约 65页
- 2023-08-01 发布于广东
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5 核移植法 1997年,克隆羊Dolly。 此后,英国罗斯林研究所又与英国PPL公司合作诞生了世界上第一批转基因绵羊Polly。 人类凝血因子IX基因。以绵羊转基因胎儿成纤维细胞作核供体,获得了3只转基因绵羊。 此法的转基因效率高于原核显微注射法,而且在核移植前可以选择后代的性别,有利于转基因群体的建立,节约时间和费用。 当前第30页\共有65页\编于星期四\7点 当前第31页\共有65页\编于星期四\7点 6 受体介导法 早期胚胎细胞内存在胰岛素受体,使受体介导的基因转移成为可能。 1999年,IvanvaM.M构建了一个同时携有胰岛素-多聚赖氨酸基因DNA的构建体。将胚胎与其共培养3小时,发现该重组体可穿过透明带在卵裂球核旁区聚集。 优点:不需显微操作,而且使用的运载工具对胚胎无明显毒害作用,为将来的基因治疗提供了一条新途径。 当前第32页\共有65页\编于星期四\7点 转基因胚胎的培养与移植 哺乳动物:将处理完毕的转基因受精卵或胚胎,经过短期的体外培养,就可移植到假孕鼠的输卵管中进行发育。 注射后的小鼠受精卵的卵周隙,应清晰可辨。 鱼类和两栖类:不需移植,体外发育。 当前第33页\共有65页\编于星期四\7点 转基因动物外源DNA的检测 外源基因的Southern印迹分析 检测基因转录的Northern印迹分析 PCR技术 表达产物检测--蛋白质分析检测转移外源DNA 荧光蛋白基因 当前第34页\共有65页\编于星期四\7点 转GFP的小鼠 当前第35页\共有65页\编于星期四\7点 Transgenic Fish Salmon, trout Can grow up to 6 times faster than wildtype fish Most have extra copies of growth hormone (GH) gene 当前第36页\共有65页\编于星期四\7点 GloFish, originally developed in Singapore as a way to monitor water pollution The normally black-and silver zebrafish was turned green or red by inserting various version of the GFP gene. 当前第37页\共有65页\编于星期四\7点 Uses for transgenic animals Gene pharming Xenotransplantation Industrial Food/Feed Model system 第二节 转基因动物的应用前景 当前第38页\共有65页\编于星期四\7点 一、转基因动物在基础性研究中的学术价值 1、研究基因的结构和功能 启动子和增强子 2、研究基因的组织特异性表达 3、基因多级调节系统的研究 有的目的基因必须在另一基因的表达产物激活后才能表达,从而对目的基因的功能和调节进行研究,这种实验体系就称为基因多级调节系统。 4、细胞功能的研究 毒素基因+细胞类型特异性的启动子 当前第39页\共有65页\编于星期四\7点 转neurogenin1启动子控制之下的β-半乳糖甘酶报告基因的小鼠 Trangenic mouse embryo in which the promoter for a gene expressed in neuronal progenitors (neurogenin 1) drives expression of a beta-galactosidase reporter gene. Neural structures expressing the reporter transgene are dark blue-green. (Dr. Anne Calof) 当前第40页\共有65页\编于星期四\7点 二、转基因动物在医药领域的应用 1、生产药用蛋白(动物生物反应器、乳腺生物反应器) 2、进行基因治疗 3、在人类组织器官移植中的应用 4、病毒性疾病 5、建立人类疾病的转基因动物模型 当前第41页\共有65页\编于星期四\7点 1 基因制药 The use of transgenic animals (and sometimes plants) to produce medicine. 利用转基因动物生产药品 “Turning milk into medicine.” 当前第42页\共有65页\编于星期四\7点 从理论上说,利用转基因动物制药的成本远比传统的生物制药成本低。瓶颈在于转基因动物的制备。 汤姆·纽伯里:
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