LS_T 6128-2017粮油检验 粮食中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定 超高效液相色谱法.pdf

ICS 67.040X 04LS中华人民共和国粮食行业标准LS/T6128—2017粮油检验粮食中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2 的测定超高效液相色谱法Inspection of grain and oils—Determination of aflatoxin B,,B2,G,,Gz in grainsUltra-high performance liquid chromatography2017-10-27发布2017-12-20实施国家粮食局发布 LS/T 6128—2017前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草，本标准由国家粮食局提出。本标准由全国粮油标准化技术委员会(SAT/TC270)归口。本标准起草单位：国家粮食局科学研究院、潮南国家粮食质量监测中心、吉林省粮油卫生检验监测站、黑龙江粮油卫生检验监测站、北京农业质量标准与检测技术研究中心。本标准主要起草人谢刚、王松雪、李丽、黎蓉、叶金、王嫂媛、昊字、辛媛嫂、倪小英、石家源、罗雁、陆安祥，1 LS/T 6128—2017粮油检验粮食中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定超高效液相色谱法1范围本标准规定了粮食及其制品中黄曲需毒索B,、B、G;、G，超高效减相色谱法测定的原理、试剂与仪器设备、分析步骤、结果计算等内容。本标准适用于粮食及其制品中黄曲需毒素B、B:、Gi、G，的测定。本标准方法黄曲霉毒索B,检出限为0.2pg/kg，定量限为0.4μg/kg;黄曲需毒索G，检出限为0.5μg/kg，定量限为1.5pg/kg：黄曲霉毒索B、G，检出限为0.1μg/kg，定量限为0.3μg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单适用于本文件，GB/T602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备GB/T 54911粮食、油料检验扦样、分样法GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3原理用提取液提取试样中的黄曲毒素B、B、G、Gz，免疫亲和柱净化、富集后，通过配有大流通池的超高效液相色谱仪进行测定，外标法定量。4试剂与仪器设备除另有规定外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682中一级用水要求，4.1试别4.1.1甲醇(CH,OH)：色谱纯.4.1.2乙睛(CH,CN)：色谱纯。4.1.3氧化钠(NaCI)：分析纯.4.1,4甲醇水溶液：量取70体积甲醇（4.1.1)，加人30体积水，混匀。其他试剂符合GB/T602的要求，4.2标准品4.2.1黄曲等毒索标准品（黄曲霉毒索B;、Bz、G、G，）；纯度≥99%；或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。4.2.2标准储备液，分别称取黄曲需毒索B（AFB,）、黄曲霉毒索B,（AFB）、黄曲需毒素G（AFG1)、黄曲需毒素G;(AFG,）标准品(4.2.1)各0.1mg(精确至0.01mg)，用甲醇(4.1.1)溶解并定容至10mL，- LS/T 6128—2017得到浓度约为10pg/mL的储备液。一20C避光保存。4.2.3混合标准减：准确移取适量的AFB;、AFB,、AFG、AFG；标准储备液（4.2.2)于100mL容量版中，甲醇(4.1.1)定容，得到混合标准减浓度分别为AFB，和AFG;：100pg/L，AFB,和AFG：30μg/L。一20避光保存。4.2.4混合标准工作液：准确移取适量混合标准溶液（4.2.3)至10mL容量中，用甲醇（4.1.1)定容，配制成AFB,和AFG,浓度为0,1μg/L~50μg/L,AFB,和AFG,浓度为0.03μg/L~15.0μg/L的系列标准工作液，备用。4C避光密封保存，有效期一周。4.3材料与仪器设备4,3,1黄曲霉毒素总量免疫亲和柱，4.3.2定性滤纸：12cmWhatman4号，或性能相当者。4.3.3玻璃纤维滤纸：9cmWhatmanGF/A，或性能相当者。4.3.4滤膜：0.22μm孔径，有机相（所选用滤膜应采用标准溶液检验确认无吸附现象，方可使用）。4,3.5注射器：20mL4.3.6离心管：50mL4.3.7三角瓶；250mL，4.3.8量筒。4.3.9天平：感量0.1g和0.01mg4.3.10高速粉碎机。4.3,11氮气吹干仪。4.3,12高速均质器：转速6500r/min~24000r/min，4.3.13离心机转速≥5000r/min。4.3. 14调速多用振葛器（振荡频率≥150次），4.3.15空气压力泵。4,3.16试验筛：1mm孔径。4.3.17液相色谱柱；C18柱（柱长50mm或100mm，柱内径2.1mm，填料粒径1.7μm），或性能相当者。4.3.18超高效液相色谱仪：包括超高效液相色谱仪、