DB33_T 701-2008(2013)配合饲料中磺胺类药物的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 65.120B 54DB33备案号：23830-2009浙江省地電方标准DB33/T701—2008(2013)配合饲料中磺胺类药物的测定高效液相色谱法Determination of sulfonamides in formula feedsHighperformance liquid chromatography2008-07-07发布2008-08-07实施浙江省质量技术监督局发布 DB33/T 701—2008 (2013)前言本标准附录A、附录B为资料性附录。本标准由浙江省水产标准化技术委员会提出并归口。本标准起草单位：宁波市海洋与渔业研究院、台州市水产技术推广站。本标准主要起草人：杨家锋、段青源、程岩、钟惠英、卓华龙、朱励华、郑丹。 DB33/T 701—2008 (2013)引言饲科中磺胺类药物的测定，已有国家标准：GB/T19542-2007《饲料科中磺胺类药物的测定--高效相色谱法》，该标准规定了饲料中磺胺嘧啶，磺胺二甲基啶，磺胺间甲氧嘧啶，磺胺甲嗯唑，磺胺唑嗯啉等5种磺胺类药物的测定方法。与该标准相比，本标准适用于检测的药物品种更广。当需要对饲料中磺胺嘧啶，磺胺二甲基嘧啶，磺胺间甲氧嘧啶，磺胺甲嗯唑，磺胺唑嗯啉含量进行仲裁检验时，应优先依据GB/T19542—2007进行。 DB33/T 701—2008 (2013)配合饲料中磺胺类药物的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了配合饲料中磺胺、磺胺嘧啶、磺胺噬噻唑、磺胺吡啶、磺胺唑嗯啉等15种磺胺类药物的高效液相色谱测定方法。本标准适用于配合饲科中磺胺、磺胺瞻啶、磺胺唑、磺胺吡啶、磺胺甲基陆啶、磺胺5-甲氧陆啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺甲基异隐唑、磺胺6-甲氧嘧啶、磺胺多率、磺胺异嗯唑、磺胺二甲氧哒嗪、磺胺唑嗯味15种磺胺类药物含量的测定，2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的移改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法原理试样中磺胺类药物用乙睛一氯仿落液提取，正已烷除杂质，经液一液萃取，浓缩，微孔滤膜过滤后，用反相色谱柱分离，累外检测器检测，外标法定量。试剂与材料除另有规定外，试剂均为分析纯，水符合GB/T6682中二级水的规定。4.1 乙酸.4.2乙睛：色谱纯。4.3甲醇：色谱纯。4.4氯仿。4.5正已烷。4.6无水硫酸钠。4.7 20%甲醇溶液：取20mL甲醇用水溶解并稀释至100mL4.8 乙睛-氯仿混合溶液（10+1，v/v）。4.9乙-氯仿混合落液（1+2，v/v）。4.1010%硫酸钠溶液：称取10g无水硫酸钠，用水溶解并稀释至100mL。4.112%硫酸钠溶液：称取2g无水硫酸钠，用水溶解并稀释至100mL。4.121%乙酸溶液：乙酸-水（1+99，v/v)，pH=3.04.13磺胺类药物标准品：纯度大于98%磺胺，磺胺嘧啶，磺胺噻唑，磺胺吡啶，磺胺甲基瞻啶，磺胺5-甲氧陆啶，磺胺二甲基嘧啶，硕胺甲氧哒嗪，磺胺氧哒嗪，磺胺甲基异嗯唑，磺胺6-甲氧嘧啶，磺胺多辛，磺胺异嗯唑，磺胺二甲氧哒嗪，磺胺喹嗯啉。4.14磺胺类药物标准溶液4.14.1磺胺类药物标准贮备液：准确称取15种磺胺类标准品各100.0mg，分别放入100mL的棕色容量瓶中，用甲醇溶解，并稀释定容至刻度，摇勾。该溶液中15种磺胺类药物浓度均为1.00mg/mL。置1 DB33/T 701—2008 (2013)4℃C冰箱中保存（保存期不超过3个月）。4.14.2磺胺类药物混合标准中间液：分别移取15种磺胺类药物标准贮备液（4.14.1）各1.00mL于100mL棕色容量瓶中，用20%甲醇（4.7）稀释定容，即得混合标准中间液。该标准溶液含各种磺胺浓度均为10.0μg/mL，置4C冰箱中保存（保存期不超过1周）。4.14.3磺胺类药物混合标准工作液：分别移取0.05、0.1、0.2、0.5、1.0mL混合标准中间液（4.14.2），用20%甲醇（4.7）稀释定容至1.0mL，即得混合标准工作液。该混合标准工作液中含每种胺浓度分别为0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μg/mL，现用现配5仪器与设备5.1高效液相色谱仪配备紫外检测器。5.2 分析天平：感量为0.0001g5.3均质器。5.4高速离心机：8000r/min。5.5氮吹仪。5.6旋涡混合器。5.7真空旋转蒸发仪。5.8聚四氟乙烯离心管：15mL。5.9容量瓶：100mL5.10玻璃鸡心瓶：100mL5.11聚四氟乙烯滤膜，孔径0.45μm。6分析步骤6