SN_T 5115-2019进出口食用动物、饲料中卡巴氧测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

ICS 65. 020.30B 42SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 5115—2019进出口食用动物、饲料中卡巴氧测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of carbadox in edible animals and feeds forimport and export---LC--MS/MS method2019-09-03 发布2020-03-01实施中西世国出版社有限公司中华人民共和国海关总署HG944440022162发布技网邮刮卉涂层激活密码 SN/T 5115—2019前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳海关、深圳市检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：刘建利、林黎、罗耀、史卫军、牛娜、孙洁、廖立珊、曹琛福、张彩虹、杨俊兴、沈金灿、张毅、吕建强、花群义、秦智锋。 SN/T 5115—2019进出口食用动物、饲料中卡巴氧测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了进出口食用动物、饲料中卡巴氧及其代谢物喹嗯啉-2-羧酸残留量的液相色谱串联质谱测定方法。本标准适用于进出口猪、鸡、鱼等饲料中卡巴氧，以及食用动物猪、牛、羊、鸡、鸭等血液中卡巴氧代谢物喹嗯啉-2-羧酸残留量的液相色谱串联质谱测定方法的测定和确证。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要动物血液样品通过加入蛋白酶水解，盐酸酸化，离心过滤后，分别用乙酸乙酯和磷酸盐缓冲溶液提取，过Oasis MAX固相萃取柱净化。用2%甲酸乙酸乙酯溶液洗脱，氮吹尽干,用0.1%甲酸-乙腈溶液溶解残渣，样液供液相色谱串联质谱仪测定，内标法定量。饲料样品经0.1%甲酸-乙腈溶液提取、离心，加人固相萃取填料净化，取上清液氮吹尽干，定容、过膜，供液相色谱串联质谱测定，外标法定量。4 试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为优级纯，实验用水应符合GB/T6682中规定的一级水。4.1乙腈：色谱纯。4.2甲醇：色谱纯。4.3甲酸：分析纯。4.4浓盐酸：分析纯。4.5乙酸乙酯：分析纯。4.6磷酸二氢钾:分析纯。4.7磷酸氢二钾:分析纯。4.8氢氧化钠：分析纯。4.9Tris 缓冲溶液:0.2mol/L,pH=9.6。称取 24.2 g Tris 碱,用 900 mL水溶解,用盐酸调节 pH=9.6,定容至 1 L。4.10Protease 蛋白酶溶液:50 mg/mL。4℃保存。1 SN/T 5115—20194.110.1 mol/L氢氧化钠溶液：称取 4g氢氧化钠，用水溶解并定容至1L。4.120.1%甲酸溶液:准确吸取1mL甲酸,用水定容至1 L,混匀。4.130.1 mol/L磷酸盐缓冲溶液(pH=7.0):13.6 g磷酸二氢钾和17.4 g磷酸氢二钾，用水溶解，用氢氧化钠溶液调节 pH=7.0,定容至 1 L。4.140.2 mol/L乙酸盐缓冲溶液(pH=5.2):2.52g乙酸和12.95 g乙酸钠溶解于800 mL水中,用氢氧化钠溶液调节pH=5.2,加水定容至 1 L。4.152%甲酸-乙酸乙酯溶液：取10 mL甲酸，用乙酸乙酯定容至500 mL。4.160.1%甲酸-乙腈溶液（9十1，体积比）：量取10mL乙腈和90mL0.1%甲酸溶液，混匀。4.17固相萃取填料组合：C18200 mg,氯化钠1 g,无水 MgSO 1 g,混合均匀。4. 183卡巴氧、喹嗯啉-2-羧酸、喹嗯啉-2-羧酸-d4 标准物质:纯度≥99%,参见附录 A。4.19标准储备液：100 mg/L。准确称取适量标准物质，分别用甲醇溶解定容，配成100 mg/L的标准储备液，在一18℃以下保存,可使用1年。4.20混合标准工作溶液：根据灵敏度和使用需要，用空白样品提取液配成不同浓度（μg/L)的混合标准工作溶液,在4 ℃保存,可使用1周。4.21同位素内标储备溶液：100 mg/L。准确称取适量喹嗯啉-2-羧酸-d4标准物质，分别用甲醇溶解定容，配成100 mg/L的标准储备液，在一18C以下保存,可使用1年。4.22同位素内标工作溶液（10 ng/mL）：将上述同位素内标储备溶液用甲醇进行适当稀释。4.23Oasis MAX固相萃取柱：500 g，3 mL，或相当者。4.24分散固相萃取填料：分别称取C1：200mg、氯化钠1g和无水MgSO41g置于15mL离心管中。4.25滤膜:0.22 um,有机相型。5仪器和设备5.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。5.2固相萃取装置