2023年浙江农业行业职业技能竞赛水生物病害防治员竞赛规程.docxVIP

附件7 水生物病害防治员竞赛规程 一、竞赛项目 水生物病害防治员，个人赛。 二、竞赛标准 以《水生物病害防治员》国家职业技能标准技师（二级）的要求为依据，适当增加新知识、新技术、新技能等内容。 三、竞赛形式 竞赛采取理论知识考试（闭卷）和技能操作考核相结合的形式进行。两部分成绩均采取百分制，按照理论知识考试得分的30%、技能操作考核得分70%的合计，计算选手个人总成绩。 四、竞赛内容 理论知识考试参考书为《水生物病害防治员》（中国农业出版社），适当结合国家渔业法律法规、方针政策、技术规范等内容。技能操作考核内容为（5个项目选3项）： 1.罗氏沼虾的解剖（附肢、内部器官等）； 2.水产品药物残留的快速检测-快检试剂盒法（五氯酚钠、地西泮2选1）； 3.常见水生动物疾病的网络诊疗； 4.革兰氏染色镜检； 5.细菌病药敏试验。 （一）理论知识考试 采取闭卷笔试的形式进行，题型为单选题、判断题和多选题。考试时间为90分钟，卷面分值为100分。由3名考官（裁判员）做好监考、评卷、复核、计算、登统等工作。 （二）技能操作考核 1.罗氏沼虾的解剖 （1）考核目的：检验选手解剖罗氏沼虾的能力和实验操作的规范程度。 （2）操作时间：30分钟。 （3）操作步骤： 每个选手操作台上备有比赛用虾一只，放置于烧杯中。按照裁判口令，比赛开始时同时按下计时器。 ① 附肢解剖。取罗氏沼虾置于解剖盘中，观察外部形态与构造是否完整。随后将腹面朝上，用镊子或剪刀镊住或剪下每个附肢的基部，由后向前依次将附肢剪下，并按照顺序摆放在比赛用纸的相应位置上。 ② 内部器官解剖。将罗氏沼虾头胸甲除去，露出内脏器官。用镊子或剪刀取出完整单侧复眼、鳃（1片）、心脏、胃、肝胰脏、肠道、触角腺（1个），并置于比赛用纸相应的位置上。 ③ 操作现场和赛后物品整理。参数选手应严格遵守实验室规章制度和考场秩序。操作结束后，将虾体、仪器按要求归位，按下计时器，向裁判举手示意操作结束，经裁判许可后，结束比赛。 2.水产品药物残留的快速检测-快检试剂盒法（以五氯酚钠为例） （1）考核目的：检验选手对水产品中五氯酚钠的快速检测能力和实验操作规范程度。 （2）操作时间：45分钟。 （3）操作步骤： 按照裁判的口令，比赛开始时同时按下计时器。 ① 样品前处理。称取5g均质后样品于50mL离心管，依次加入2mL前处理试剂、4mL正己烷和3mL乙酸乙酯，充分振荡混匀5min；置于离心机中4000 r/min离心5min； 取上层液体4mL于7mL离心管中，60℃下氮气吹干；加入 2mL正己烷和400μL样品复溶液于吹干的离心管中，上下颠倒混匀10 次；静置分层或于离心机中4000r/min离心1min，取下层溶液待测。 ② 检测步骤。从原包装中取出试剂桶，打开后取出所需数量的微孔试剂和检测条，并做好标记；微孔试剂取出后，请立即盖好试剂桶盖，将所需微孔试剂置于微孔板架中；用微量移液器移取100μL待测液于微孔试剂中，缓慢抽吸至检测样品与微孔试剂充分混匀，大约5-6次；使用计时器，开始计时；室温（20～25℃）孵育2min后，将标记好的试纸条插入微孔中，使之充分浸入溶液中，然后开始计时；室温（20～25℃）反应5min后，在反应后的3min内判读结果，其他时间判读无效。 ③结果判定。阴性（-）：T线显色比C线显色深或一样深，表示样品中待检测物质浓度低于检测限，或不含待检测物质。阳性（+）：T 线显色比C线显色浅，或T线无显色，则表示样品中待检测物质浓度高于检测限。无效：质控线C线未显色，表明操作过程不正确或检测条已失效。 ④操作现场及赛后物品的整理。参赛选手应严格遵守实验室规章制度和操作规程。操作完成后，将材料、仪器按要求归位，按下计时器，向裁判举手示意操作结束，经裁判许可后，结束比赛。 3.常见水生动物疾病的网络诊疗 （1）考核目的：考核选手对常见水生动物疾病的综合分析能力以及疾病诊断能力。 （2）操作时间：40分钟。 （3）操作步骤： 根据水生动物疾病远程辅助诊断网提供的病例信息（养殖信息、疾病特征描述及上传的发病养殖动物的病症图片等）进行综合分析，按要求答出该疾病的种类、疾病名称、主要致病病原及该病的综合防治要点等信息。 4.革兰氏染色镜检 （1）考核目的：检验选手对于水产养殖常见细菌的染色鉴定和显微镜观察操作。 （2）操作时间：25分钟 （3）操作步骤： 按照裁判的口令，比赛开始时同时按下计时器。 ①在载玻片上滴一滴蒸馏水，无菌挑取少量菌落，在载玻片上均匀涂布开，干燥。② 将制好的片在火焰上灼烧几秒，固定涂片。③草酸铵结晶紫（A液）染1分钟，自来水冲洗。④加碘液（B液）覆盖涂面染约1分钟；水洗,用吸水纸吸去水分。⑤加95%酒精（C液）数滴,并轻轻摇动进行脱色,直至无紫色液体流出,水洗，吸去水分。⑥蕃红染