SN_T 3484-2013绵羊肺腺瘤病检疫技术规范.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3484--2013绵羊肺腺瘤病检疫技术规范Quarantine protocol for ovine pulmonary adenocarcinoma2013-09-16实施2013-03-01发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局查真 SN/T 3484-2013前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国黑龙江出人境检验检疫局本标准主要起草人：张子群、吴永生、徐义刚、谢晓峰、由轩、胡晓亮。I SN/T 3484--2013绵羊肺腺瘤病检疫技术规范范围1本标准规定了绵羊肺腺瘤病的临床诊断和荧光 PCR检测方法。本标准适用于绵羊肺腺瘤病的检疫。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必拆可少的凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T 1193基因检验实验室技术要求SN/T2123出人境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范3缩略语下列缩略语适用于本文件Ct值：荧光信号量达到设定的阈值时所经历的循环EDTA:乙二胺四乙酸钠(ehylene diarrineteraacetje acid)JSRV:绵羊肺腺瘤病毒OPA:绵羊肺腺瘤病PCR:聚合酶链式反应Real-Time PCR:实时荧光PCRTaq: Tag DNA 聚合酶(Taq DNA pose)4临床诊断4.1 临床症状主要症状是渐进性呼吸障碍，尤其是在运动之后，呼吸困难明显。症状严重程度反应肺部肿瘤发展程度。呼吸道积液是OPA最典型的症状，通过听诊很容易检查到湿罗音。将病羊后肢抬起，低头，鼻孔流出大量泡沫样黏液，这就是典型的小推车试验（wheel-barrow test)”，这一特征具有典型诊断意义。病程早期，咳嗽和厌食不常见，但一旦出现明显的临床症状，体重呈渐进性下降。病程数周或数月后，常因伴发细菌性肺炎死亡，特别是溶血性曼氏杆菌（以前称为巴氏杆菌）。部分临床患病动物出现外周淋巴细胞减少症（主要是CD，和T淋巴细胞及相应的嗜中性粒细胞减少)现象，这一点可能有助于临床诊断。4.2 病理变化4.2.1户体剖检多数病例的OPA病变局限于肺部,但也可发生于胸腔内、外,转移到淋巴结和其他组织。典型病 SN/T 3484-2013例，病羊的肺肿大，由于感染后大部分肺组织，尤其是在肺的尖叶、心叶和膈叶，广泛存在大量灰白-浅黄褐色结节和灰色坚硬病变。结节直径1 cm～3cm，外形呈圆形，质地坚实，密集的结节发生融合，形成大小不一、形态不规则的大结节。病羊的肺脏比正常大2倍～3倍。病变通常存在于两个肺叶，两边的严重程度不一样。肿块坚硬，灰色或浅紫色，有光泽、半透明，并经常以狭窄的气肿带与正常的肺组织分开。在呼吸道内存在清亮泡沫状白色液体是特征病症，甚至在病变只有几毫米时·此症状也是明显的。在病变严重的情况下，当切断气管或将气管下垂时，即可从气管内流出这种液体。切开肿瘤可见多量液体渗出，细支气管周围淋巴结增生和显著增大。肿瘤表面上方的胸膜炎明显，某些病例的中间存在脓肿。非典型OPA的肿瘤由单个的或聚集的白色结节组成。表面干燥，切开肿瘤，渗出液较少，并与周围组织有明显的分界。4. 2. 2组织病理学变化组织学病变的主要特征是Ⅱ型肺细胞增生，末端细支气管非纤毛状上皮细胞也可能受影响。立方形的或圆柱状肿瘤细胞取代正常的薄的肺泡细胞。有时形成乳头状生长深人肺泡，也可能存在支气管内增生。终末细支气管和呼吸性支气管黏膜也同时形成乳头状突起，并和肺泡内的肿瘤细胞混合起来。腺瘤灶周围的肺泡腔内充满巨噬细胞。特征性病变是在临近瘤病变的肺泡中有大量肺泡巨噬细胞积聚。腺瘤灶在生长过程中，逐步侵犯大区域肺组织，腺瘤间质增多，出现大量幼稚黏液组织和纤维组织。疾病晚期可能发生广泛性的纤维变性，偶尔在黏多糖物质内可能存在松散的结缔组织结节。在并发梅迪-维斯纳病的部位，可能发生明显的血管周围、细支气管周围和间质淋巴浸润。非典型OPA的组织学特征基本上与典型OPA类似，但有炎症反应（出现大量淋巴细胞和浆细胞）和纤维变性。4.3 流行病学OPA潜伏期较长，多在半年以上，甚至长达几年。自然条件下，OPA可通过接触、飞沫传播，也可经人工感染诱发。主要经呼吸道传染，病羊咳嗽时排出的飞沫和深度气喘时呼出的气雾中含有带病毒的细胞和细胞碎屑，健康羊吸人后感染。OPA一般只感染绵羊，偶尔也见于山羊。OPA主要见于成年羊，感染羊多见于5岁以下，3岁～4岁为发病高峰期，但新生羊可诱发此病。我国许多品种的绵羊均敏感，发病羊多为3岁～5 岁的成年羊。OPA在不同国家和地区发生方式具有明显差异，主要有暴发、地方性流行和散发几