原位杂交具体步骤.docx

原位杂沟通程 以下是用含有 cDNA 的质粒酶切出 DNA 片段标记探针 对石蜡切片进展 mRNA 检测的流程图。这些试验操作方法很多参考书中均有 但没有一本书是专为这个目的而系 统地加以总结的 因此特加以综合供同行参考 在具体操作过程中很多地方可酌情变更。在临床应用中 常常可以买到已经标记好的商品探针 那么前面一大局部扩增基因、 酶切鉴定、标记探针的工作就可以省去 从石蜡切片处理做起即可。下面介绍的方法笔者已亲自做过数次 可获满足结果。 主要操作步骤 制备感受态细菌 用含目的基因的质粒转化细菌小量培育转化的细菌 小量提取质粒小量酶切质粒电泳鉴定 大量培育转化的细菌大量提取质粒 大量酶切质粒