SN_T 4150-2015化学品 离体鸡眼试验.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4150—2015化学品离体鸡眼试验Chemicals---Test method of isolated chicken eye2015-09-01 实施2015-02-09 发布中华人民共和国发布+-国家质量监督检验检疫总局刮涂层查真伪 SN/T 4150-2015前言本标准按照GB/T1.1--2009给出的规则起草，本标准等同采用联合国经济合作发展组织（OECD)化学品试验导则No.438《鉴别眼腐蚀和严重眼刺激性物质的离体鸡眼球试验法》（2009.9）（英文版）。本标准与OECD化学品试验导则No.438相比，存在以下差异：-对OECD化学品试验导则No.438进行了编辑性修改；-增加了前言部分;将附录1内容转移至术语和定义部分。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局本标准主要起草人：赵琢、柳明、刘凤娟、冯杰、张彬、王娜、于燕燕。1 SN/T 4150—2015化学品离体鸡眼试验1范围本标准规定了离体鸡眼试验(ICE)的试验准备、试验方法和结果报告。本标准适用于化学品眼腐蚀性或严重眼损伤性的鉴别试验。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T21609化学品急性眼刺激性/腐蚀性试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1角膜 cornea眼球前部的透明部分，覆盖住瞳孔和虹膜，并能接收光线。3.2角膜混浊corneal opacity检测暴露于测试物后角膜的不透明度的一种方法。角膜混浊度的增加说明其受到损伤。3.3角膜膨胀度corneal swelling在离体鸡眼实验中，用来衡量暴露于实验物中的角膜扩张范围的客观指标。通过对基线（未受试前)角膜厚度和对在常规间隔内暴露于实验物质之后的角膜厚度进行测量计算出该值并用百分比表示，角膜膨胀程度表示角膜损伤度。3.4离体鸡眼试验isolated chicken eye test;ICE使用一种器官模型,在体外较短时间内，这种模型能够维持鸡眼活性。在这种试验方法中，通过测定角膜肿胀、角膜混浊度和荧光素滞留度对鸡眼损伤程度进行评估。其中角膜肿胀分析用于定量评价，其他参数定性评价。按照定量评价结果（计算得出的总刺激指数），或者定性评价结果（按照GB/T21609中的方法进行定性评价)对体外眼腐蚀性和严重眼损伤性进行分类。定量和定性的方法所得结果都可以预测体内实验物质潜在的眼腐蚀性和严重眼损伤性。3.5裂隙灯显微镜slit-lamp microscope该仪器通过双目镜显微镜对眼进行放大形成立体、垂直的镜像对眼进行直接检查。在ICE实验中，该仪器不仅用于观察鸡眼的结构，而且可用与它相连的厚度测量仪器对角膜厚度进行定量测定。1 SN/T 4150—20154试验准备4.1鸡眼球来源和年龄用于本方法的鸡眼球应是从家禽屠宰场收集的，选择可供人类食用的健康动物的眼球进行实验。本试验方法应使用家禽屠宰场传统加工的童子鸡（约7周大，重1.5kg～2.5kg)进行实验。4.2眼球的收集与实验室运送通过电击使鸡电休克，切开脖子放血后迅速取下鸡头，鸡头从屠宰场运出时应放在常温的塑料箱中，并用等渗盐水润湿的毛巾增湿，并尽快运送到实验室，尽量减少其变质和被细菌污染。收集鸡头和取鸡眼用于ICE试验的间隔时间应尽量短（通常在2 h内），确保不影响试验结果。所有用于实验的鸡眼均应来自同一天采集的同一鸡眼组。4.3用于ICE试验鸡眼的选择标准及数量鸡眼摘出后具有高荧光素滞留度（大于0.5，见表2)的眼球和角膜混浊度评分大于0.5（大于0.5，见表1)的眼球应弃用。每个处理组及其对照组应包含至少3只鸡眼。阴性对照组或溶剂对照组（如使用除盐水外的其他溶剂)应包含至少1只眼球。表1角膜混浊度评分评分观测结果0无混浊0.5非常轻微的混浊1分散或弥漫性区域，虹膜细节清晰可见2可轻易辨别半透明区，虹膜细节略有模糊3严重的角膜混浊，具体的虹膜细节不可见，瞳孔大小难以分辨4角膜完全混浊，虹膜不可见表2荧光素滞留度评分评分观测结果0无荧光素滞留0.5很少数的单细胞染色整个角膜处理区的单细胞染色12 病灶或稠密汇合的单细胞染色3大面积汇合的角膜荧光素滞留5试验方法5.1鸡眼的预处理5.1.1鸡眼的预处理将眼脸仔细切除，注意不要损坏角膜。将一滴2%（质量浓度)荧光素钠滴加于角膜表面作用几秒2 SN/T 4150--2015后迅速评估角膜完整性，然后用等渗盐水冲洗。利用裂隙灯显微镜对荧光素处理过的眼球进行检查，确保角膜未受损（荧光素滞留度和角膜混浊度评分均不大于0.5，评分方法参见6.1）