SN_T 3648-2013饲料中呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林含量的检测方法 液相色谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3648--2013饲料中呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林含量的检测方法液相色谱法Determination of furazolidone, nitrofurantoin , furaltadone and nitrofurazonein animal feeding stuff-HPLC method2013-08-30 发布2014-03-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T 3648--2013前 言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局。本标准主要起草人：林峰、姚仰勋、吴映璇、欧阳少伦、林海丹。 SN/T 3648—2013饲料中呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林含量的检测方法液相色谱法 范围1 本方法规定了饲料中呋喃唑酮峡响妥因、呋喃它酮、呋喃西林含量的液相色谱检测方法。本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中呋嘲唑酮喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林原药含量的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于体文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1　饲料采样3样品制备按GB/T14699.1规定，取有代表性的样品，四分法缩减至约200g经粉碎，全部过1mm孔筛，混匀装入玻璃磨口瓶中备用。样品制备操作过程中应防止样品受到污染或发生待检测物质含量的变化。4　方法提要样品经乙腈-N,N-二甲基甲酰胺(DMF)混合液提取，提取液用阳离子交换柱净化，高效液相色谱-紫外检测器测定，外标法定量。5 试剂除特别规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。5.1 乙腈:HPLC级。5.2甲醇:HPLC级。5.3 N,N-二甲基甲酰胺(DMF)。5.4磷酸。5.5盐酸。5.6正已烷。5.7氨水:25%。5.81mol/L磷酸67mL磷酸加水至1000mL,混合均匀。5.90.1mol/L盐酸：8.3mL盐酸加水至1000mL,混合均匀。 SN/T 364820135.10氨水-甲醇溶液：氨水十甲醇（5十95,体积比）。5.11样品提取剂：乙腈+DMF(8十2,体积比）。5.12乙腈-水-DMF混合液：乙腈十水十DMF25十70十5，体积比）。5.13呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林标准品：喃唑酮（Furazolidonc,CAS号 67-45-8）、呋喃妥因（Nitrofurantoin，CAS号67-20-9）、呋喃它酮盐酸盐（Furaltadonc，CAS号139-91-3，计算时需换算为以喃它酮计）、呋喃西林（Nitrofurazone,CAS号59-87-0），纯度大于或等于99%。5.14呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林标准储备液:200 mg/L。分别称取适量呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林标准品（准确至0.1 mg)于100 mL棕色容量瓶中，加人 20 mL DMF(5.3），轻摇使标准品完全溶解，用甲醇-水（1十1，体积比）稀释至刻度，此溶液1mL分别相当于200μg的呋喃唑酮、呋喃妥因、喃它酮、呋喃西林，该储备液置于4℃冰箱中避光保存，使用前需置于暗处平衡至室温方可使用。5.15喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林混合标准中间液：50 mg/L。分别吸取 6.25 mL喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、味喃西林标准储备液（5.14）于25mL棕色容量瓶中，甲醇定容至刻度，混匀，此溶液1mL分别含有5 μg的呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林，该混合标推中间液置于4℃冰箱中避光保存，使用前需置于暗处平衡至室温方可使用。5.16呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林混合标准工作液：根据需要吸取一定量的 50 mg/L 呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃它酮、呋喃西林混合标准中间液（5.15)用乙腈-水~DMF混合液（5.12)稀释成适当浓度的混合标准工作液，使用前配制。5.17阳离子交换柱:Oasis MCX阳离子交换柱，150 mg，3 mL，或同等效能的阳离子交换柱。使用前依次用5 mL甲醇、5 mL水(pH4,磷酸调节)活化备用。5.180.45μm滤膜：有机相过滤用。6　仪器6.1高效液相色谱仪，配有紫外检测器。6.2 振荡器。6.3固相萃取装置,带真空泵。6.4离心机,转速大于或等于 4 000 r/min。6.5吹氮浓缩装置。6.6旋转蒸发器。6.7漩涡混匀器。6.8不锈钢筛,筛孔 1 mm。7 分析步骤7.1样品提取7.1.