SN_T 4812-2017进出口食用动物氨丙啉药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4812—2017进出口食用动物氨丙啉药物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of amprolium residues in live animal for import and export-LC-MS/MS method2017-07-21 发布2018-03-01实施中华人民共和国发布3国家质量监督检验检疫总局网电话4569821550m刮涂层查真伪 SN/T 4812—2017前言本标准按照GB/T1.1--2009给出的规则起草本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出人境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：涂小珂、陈沛金、曾少灵、罗耀、岳振峰、胡运发、叶刚、康海宁。1 SN/T 4812--2017进出口食用动物氨丙琳药物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了兔、猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅等进出口食用动物中氨丙啉药物残留量的液相色谱-质谱/质谱检测和确证方法。本标准适用于兔、猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅的血液及兔、猪、牛、羊尿液中氨丙啉药物残留量的测定。本标准适用于出人境检验检疫工作。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样用乙沉淀蛋白后，经无水硫酸镁及氯化钠盐析分层，上清液用PSA吸附剂和石墨化炭黑萃取净化，吹氮浓缩后用流动相溶解，液相色谱-质谱/质谱仪测定，外标法定量。4试剂材料除另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的-级水。4.1甲醇：色谱纯。4.2甲酸：色谱纯。4.3乙：色谱纯。4.4乙酸铵：色谱纯。4.50.005mol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）：准确称取0.3854g乙酸铵（4.4），用水溶解并转移至1000 mL容量瓶中，加人1.00 mL甲酸（4.2），用水定容至刻度。4.6乙酸铵溶液-甲醇溶液（9：1，体积比）：准确量取90mL乙酸铵溶液（4.5)至100 mL容量瓶中，加人甲醇（4.1）,定容至刻度。4.7无水硫酸镁：550℃灼烧4h，干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。4.8氯化钠：优级纯。4.9乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）吸附剂。4.10石墨化炭黑。4.11标准物质：盐酸氨丙啉（amprolium hydrochloride,CAS:137-88-2），纯度大于 98%。4.12标准储备溶液：准确称取适量标准物质（4.11），以甲醇溶液配制氨丙啉浓度为1000μg/mL的标准溶液，一18℃避光保存。4.13标准工作溶液：移取适量的标准储备溶液（4.12），以甲醇配制浓度为10ug/mL的标准溶液，4℃1 SN/T 4812—2017避光保存，可使用1个月。4.14微孔滤膜:0.22μm，水系。5仪器和设备5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。5.2电子天平：感量0.000１g、0.001g和0.1g5.3离心机:10 000 r/min。5.4氮吹浓缩仪。5.5旋涡混匀器。5.6 移液器:量程 10 μL～100 μL、100 μL～1 000 μL和 1000 μL～5000 μL。5.7聚丙烯离心管:15 mL，具塞。6试样的制备与保存血浆：将新鲜血液采集后加人含抗凝剂的试管中，混匀，10 ℃以下，5 000 r/min离心10 min，取血浆备用；尿液：5000r/min离心去除沉淀物，取上清液备用。血浆、尿液试样均分为两份，装人洁净容器，密封，并标明标记，于一18℃以下冷冻存放。在制样操作过程中，应防止样品被污染或残留物含量发生变化。7 测定步骤7.1　提取吸取1mL试样于15 mL聚丙烯离心管中，加人 2.5mL乙腈（4.3），涡旋混匀1min，再加人0.5 g无水硫酸镁（4.7)和1.0g氯化钠（4.8），涡旋混匀1min，10℃以下，10000r/min离心5min，转移上清后再加人2.5mL乙腈，涡旋1min，10000 r/min离心5min，合并两次提取的上清液并用乙腈定容到5 mL.7.2净化上清液加人50mg乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）（4.9），如血液样品色素过重再加人10mg石墨化炭黑（4.10），涡旋1min，静止10 min。准确吸取2.5 mL上清液于氮吹浓缩仪 40 ℃吹氮浓缩至近干，加人1mL0.005 mol/L乙酸铵溶液（含0.1%甲酸）-甲醇（9：1，体积比）（4.6），涡旋混匀1 min，过0.22 μm水系滤膜，液相色谱-质谱/质谱仪测定。7,3标准工作溶液的制