SNT 1875-2007入出境船舶压舱水微生物学检测规程.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1875-2007入出境船舶压舱水微生物学检测规程Microbiological examination rules for ballast water of entry-exit ships2007-04-06 发布2007-10-16 实施中华人民共和国 在1R发布码防伪国家质量监督检验检疫总局 SN/T 1875—2007前 言本标准附录 A、附录 B、附录 C均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国河北出入境检验检疫局。本标准主要起草人：王海军、李俊成、张顺合、聂维忠、李德昕、王林、黄廷学。本标准系出人境检验检疫首次发布的行业标准。 SN/T 1875--2007入出境船舶压舱水微生物学检测规程1 范围本标准规定了入出境船舶压舱水微生物学检测的项目、程序和方法。本标准适用于对入出境船舶压舱水进行微生物学检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 4789.2　食品卫生微生物学检验　菌落总数测定CB/T 4789.3　食品卫生微生物学检验　大肠菌群测定GB/T4789.4食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB/T4789.5食品卫生微生物学检验：志贺氏菌检验GB/T4789.6食品卫生微生物学检验致泻性大肠埃希氏菌检验GB/T4789.7食品卫生微生物学检验副溶血性弧菌检验GB/T 4789.28食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂GB19489实验室生物安全通用要求SN/T1239国境口岸霍乱弧菌检验规程SN/T1757人出境船舶压舱水卫生监测规程3检测项目人出境船舶压舱水微生物学检测的重点项目包括：a）卫生学指示菌；b）沙门氏菌；c）志贺氏菌；d)致病性大肠埃希氏菌；e）霍乱弧菌;f)副溶血性弧菌;甲型肝炎病毒；g）h）轮状病毒。4　要求4.1第3章e)检测应符合GB19489中BSL-3实验室生物安全条件的相应规定，第3章列项中其他项检测应符合GB19489中BSL-2实验室生物安全条件的相应规定。4.2检验人员应经过专业技术和实验室生物安全培训，并取得资格证书。5实验室设备与试剂准备5.1细菌学检测设备细菌学检测主要仪器设备有：ⅡI型生物安全柜；1 SN/T 1875—2007-恒温培养箱（37℃±1℃及44℃±0.1℃）；-高压蒸气灭菌器；干燥箱；普通光学显微镜。5.2 病毒学检测设备病毒学检测主要仪器设备有：ⅡI 型生物安全柜；电镜；-PCR检测仪;电泳仪;凝胶成像系统；-高速离心机；-低温冰箱（一40℃分析天平(精确到高压蒸气灭菌器；干燥箱。5.3 培养基与试剂B/T4789.28规定执行。细菌学检测项目的培养基6　压舱水样品采集与处理6.1压舱水样品采集按SI6.2样品处理参见附录 A。7检测流程检测流程见图 1。方英粉细菌总数测定滤过增菌或直接究离培养子电镜技术、PCR技术报告【用于第3章性)】［用于第3章中g】和h)］总大肠菌群与粪大肠菌群检测报告可凝疑菌落纯分离培养证实试验生化鉴定血清学鉴定报告动物实验毒力测定报告图 1 检测流程图 SN/T 1875—20078检测方法8.1细菌总数检测按GB/T 4789.2规定执行。8.2大肠菌群与粪大肠菌群检测按GB/T4789.3规定执行。8.3沙门氏菌检测按GB/T4789.4规定执行。8.4　志贺氏菌检测按GB/T4789.5规定执行。8.5致病性埃希氏大肠杆菌检测按GB/T4789.6规定执行。8.6霍乱弧菌检测按SN/T1239规定执行。8.7副溶血型弧菌检测按GB/T4789.7规定执行。8.8甲型肝炎检测参见附录B。8.9轮状病毒检测参见附录9检测结果与报告9.1根据检测结果出具报告9.2对发现的新菌株和毒株及未能鉴定的菌步鉴定。 SN/T 1875—2007附录A（资料性附录）压舱水集菌和富集病毒方法A.1过滤膜集菌方法A.1.1器材滤膜集菌器材主要有：过滤装置;-灭菌微孔过滤膜：孔径0.45μm、膜直径47mm，具3mm疏水边缘；-灭菌过滤膜杯：容量100mL、直径47mm;一灭菌无齿镊子。A.1.2　方法A.1.2.1无菌操作取微孔过滤膜平铺于过滤膜杯底部。A.1.2.2将过滤膜杯固定于过滤装置上。A.1.2.3将水样注人过滤杯中，启动抽滤系统。A.1.2.4水样抽滤完毕，用无齿镊夹取微孔滤膜边缘部分，此滤膜可以直接置培养基中培养或增菌液中增菌。滤膜直接用于培养时,截留细菌面应向上,并与培养基面紧贴