SN_T 2758-2011美国圆柏苹果锈病菌检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2758-2011美国圆柏苹果锈病菌检疫鉴定方法Quarantine and identification ofGymnosporangium juniperi-virginianae Schwein2011-07-01 实施2011-02-25 发布10s0中华人民共和国发布B国家质量监督检验检疫总局 SN/T 2758--2011前言本标准按照GB/T 1.12009 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国山东出人境检验检疫局。本标准主要起草人：封立平、厉艳、刘会梅、纪瑛、王英超、吴兴海。- SN/T 2758—2011美国圆柏苹果锈病菌检疫鉴定方法1 范围本标准规定了植物检疫中美国圆柏苹果锈病菌检疫鉴定方法。本标准适用于栗黑水疫霉病菌寄主苗木、插枝等植物材料及其土壤和介质中的栗黑水疫霉病菌的鉴定(参见附录 A)。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T18085--2000植物检疫　小麦矮化腥黑穗病菌检疫鉴定方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件3. 1冬孢子角 telia在春天潮湿环境下，菌瘤表面许多凹陷部位形成小突起，并迅速膨胀，变为胶状的、淡黄色或金黄色的冬孢子角，内含大量冬孢子。在午燥环境下，胶状的冬孢子角干缩为卷丝状，遇雨又膨胀为胶状。3.2冬孢子teliospore锈菌的双核厚壁有性休眠孢子，由双核菌丝的顶端细胞发育而来。冬孢子萌发产生有隔担子。3.3担子basidia由冬孢子萌发产生的有分隔的组织。担子由四个细胞构成，每个细胞有一短梗，顶端产生担孢子。3.4担孢子basidiospore担子由四个细胞构成，每个细胞有一短梗，小梗上面着生的单胞、无色物为担孢子。3.5性孢子器pycnia担孢子萌发产生单核的初生菌丝，初生菌丝集中起来形成的性器官为性孢子器，生在寄主表皮组织下。性孢子器中有多数向心或平列的菌丝，其顶部生性孢子。性孢子器顶部有孔口，孔口边有孔丝和受精丝,后者弯曲伸向器外,埋于分泌的粘液中。3.6性孢子．pycniospore性孢子器顶部生单胞、单核、无色、圆形或卵形的小孢子即为性孢子。 SN/T 2758--20113.7锈孢子器aecia性孢子与受精丝结合或单核菌丝结合产生双核次生菌丝，由此再产生锈孢子器。典型锈孢子器有包被，包被一般是由锈孢子转化的细胞连接一至几层形成膜状，多数是黄白、黄、橙等色，成熟后按一定方式开裂，使锈孢子器分为杯状、管状、囊状等类型。3.8锈孢子aeciospores存在于锈孢子器中，多数为串生、单胞、双核、黄色、球形或卵形，表面有刺或疣，疣有平截的、尖削头的，锈孢子也叫春孢子。4原理4.1分类地位美国圆柏苹果锈病菌(Gymnosporangium juniperi-virginianae Schwein,异名 Gymnosporangiummacropus Link 和 Gymnosporangium virginianum Sprengel 等)属担子菌亚门(Basidiomycota),锈菌纲（Urediniomycetes），锈菌目（Uredinales），柄锈菌科（Pucciniaceae），胶锈菌属（Gymnosporangium）。主要以锈孢子形式危害苹果树的叶片、茎和果实，可引起美国苹果锈病(Cedar-apple rust)，也以冬孢子形式危害圆柏和刺柏属植物。4.2鉴定依据该病菌为转主寄生菌,冬孢子以菌瘿的形式寄生在圆柏等植物上，锈孢子器寄生在苹果等植物上。该菌的寄主范围、寄主感病的症状特征、冬孢子和锈孢子的形态特征是该鉴定该病菌的依据。5仪器和试剂5.1＇仪器5.1.1万能显微镜（具油镜镜头）。5. 1.2具透射光源的体视显微镜（最大放大倍数不低于50倍）。5.1.3目镜和镜台测微尺。5.1. 4超净工作台。5.1.5 微量可调加样器(5 μL～20 μL)。5.1.6E医用解剖针、解剖刀。5.1.7 刻度离心管:10 mL或20 mL。5.1.8高压灭菌器。5.1.9载玻片:长X宽为 25.4 mm×76.2 mm,厚0.8 mm。5.1. 10盖玻片:18mm×18 mm。5.1.11加样器枪头(2 μL～20 μL)。5. 1. 12 三角瓶(250)mL。5.2 试剂5.2.1席尔氏浮载剂（见GB/T18085-2000中附录 A)。5.2.2显微镜物镜镜头油。2 SN/T 2758—20116 现场检疫6.1 隔离检疫刺柏属和苹果属、山楂属繁殖材料引进后，引种单位应按照指定地点进行引进种苗隔离