SN_T 2654-2010进出口动物源性食品中吗啉胍残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2654—2010进出口动物源性食品中吗啉胍残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法Determination of moroxydine residue in foodstuffs of animal origin forimport and export-LC-MS/MS method2010-11-01发布2011-05-01实施中华人民共和国数码防伪发布国家质量监督检验检疫总局 SN/T2654—2010前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草，本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国河南出入境检验检疫局、中华人民共和国重庆出人境检验检疫局。本标准主要起草人：杨冀州、王国民、祝伟霞、郭俊峰、刘亚风、魏蔚、刘毅。 SN/T2654—2010进出口动物源性食品中吗啉胍残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了动物源性食品中吗啉胍残留量的制样方法与液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾、牛肉、牛肝、牛肾、鸡肉、鸡肝、鸡肾、鱼肉和虾仁中吗啉胍残留量的液相色谱-质谱/质谱的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3试样的制备与保存取样品中具有代表性的可食部分500g，用组织捣碎机充分捣碎，均分成两份分别装入洁净容器，密封并做好标识，于一18℃以下保存。制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。4方法提要样品中残留的吗啉胍经三氯乙酸溶液提取并沉淀蛋白，肝脏样品需先过C18固相萃取柱净化，其他基质样品直接加入庚烷磺酸钠离子对试剂进行固相萃取净化，液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。5试剂和材料除特别规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。5.1乙睛：高效液相色谱级。5.2甲醇：高效液相色谱级。5.3庚烷磺酸钠：高效液相色谱级。5.4乙酸胺：高效液相色谱级。5.5三氯乙酸。5.6冰乙酸。5.75%三氯乙酸溶液：称取5.0g三氯乙酸（5.5），溶于100mL水中。5.80.5mol/L庚烷磺酸钠溶液：称取10.1g庚烷磺酸钠（5.3），溶于100mL水中。5.95%甲醇水溶液（5+95，体积比）：量取50mL甲醇、950mL水混合。5.1020mmol/L乙酸胺缓冲溶液：称取1.54g乙酸胺（5.4），溶于700mL~800mL水中，用乙酸调节pH4.0后用水定容至1000mL。1 SN/T2654—20105.11乙酸胺缓冲溶液十乙腈（70+30，体积比）：量取70mL乙酸胺缓冲液（5.10）、30mL乙腈混合5.12盐酸吗啉胍标准品（moroxydinehydrochloride）：CAS编号3731-59-7，含量大于等于99%。5.13吗啉胍标准储备液：准确称取适量吗啉胍标准品（5.12），用甲醇配制成浓度为100μg/mL的吗啉呱标准储备液。此溶液在0℃～4℃避光保存，可使用3个月5.14吗啉胍中间标准液：准确吸取0.5mL标准储备液（5.13），用甲醇定容至100mL，浓度为500ng/mL。此溶液在0℃～4℃避光保存，可使用1个月。5.15吗啉胍标准工作液：根据需要吸取适量吗啉胍中间标准溶液（5.14），用空白样品提取液稀释成适当浓度的基质工作溶液，使用前配制。5.16OasisHLB固相萃取柱：3mL，60mg，或相当者；使用前用3mL甲醇和3mL水活化，并保持柱体湿润。5.17C1s固相萃取柱：3mL,200mg，或相当者；使用前分别用3mL甲醇和3mL水活化，并保持柱体湿润。5.180.22μm滤膜：有机相。仪器和设备66.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI)。6.2分析天平：感量0.1mg，0.01g。6.3涡旋混匀器6.4离心机：4000r/min。6.5固相萃取装置。6.6氮吹仪。组织捣碎机。6.77测定步骤提取与净化7.1#肌肉、肾脏、鱼肉、虾肉7.1.1月称取约2g试样（精确到0.01g）于50mL具塞离心管中，加人20mL三氯乙酸溶液（5.7），涡旋混匀3min，加0.5mL庚烷磺酸钠溶液（5.8)至样液中，混匀后于4000r/min离心10min。移取5mL离心后的上清液，以小于1mL/min的流速通过HLB固相萃取柱（5.16），待样液全部流过固相萃取柱，依次用3mL水、3mL甲醇溶液（5.9)淋洗固相萃取柱，弃去全部流出液，在65kPa负压下抽干固相萃取柱5min，用3mL甲醇洗脱被测物，洗脱液于45℃水浴中氮吹浓缩至干，0.5mL乙酸胺缓冲溶