SNT 1777.2-2007动物源性食品中大环内脂类抗生素残留测定方法 第2部分：高效液相色谱串联质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1777.2---2007动物源性食品中大环内酯类抗生素残留测定方法第2部分：高效液相色谱串联质谱法Determination of macrolide antibiotic residues inanimal-derived food--Part 2 : LC-MS/MS method2007-04-06发布2007-10-16实施HO中华人民共和国发布宝拨国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 1777.2--2007前言SN/T1777《动物源性食品中大环内酯类抗生素残留测定方法》共分为两个部分：第1部分：放射受体分析法；第2部分：高效液相色谱串联质谱法。本部分为 SN/T1777的第2部分。本部分的附录A、附录B均为资料性附录。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分由中华人民共和国辽宁出人境检验检疫局、中华人民共和国浙江出人境检验检疫局、中华人民共和国上海出人境检验检疫局负责起草。本部分主要起草人：林维宣、谢文、姜伟、李一尘、奚君阳、于灵、徐凤敏、杨春光、王敏。本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 1777.2—2007动物源性食品中大环内酯类抗生素残留测定方法第2部分：高效液相色谱串联质谱法1范围SN/T1777 的本部分规定了动物源性食品中螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素、泰乐菌素、红霉素、罗红霉素、交沙霉素液相色谱串联质谱测定方法。本部分适用于猪肉、禽肉、肝脏、肾脏和蜂蜜中七种大环内酯类抗生素残留量的检测。2　测定方法2.1方法提要用乙睛提取样品中大环内酯类抗生素，正已烷脱脂，C1：固相萃取小柱净化，液相色谱串联质谱测定，外标法定量。2.2试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。2.2.1乙腈:高效液相色谱级。2.2.2正已烷：高效液相色谱级。2.2.3甲醇：高效液相色谱级。2.2.4甲酸：高效液相色谱级。2.2.5·氯化钠。2.2.6拿氢氧化钠。2.2.7磷酸二氢钠。2.2.8　乙腈饱和正已烷。mol/L氢氧化钠：称取 4g氢氧化钠,并用水稀释至1L。2.2.10甲醇：水（2：8,体积比）。2.2.11无水硫酸钠：650℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，贮于密封瓶中备用。2.2.12磷酸盐缓冲溶液：溶解13.8g磷酸二氢钠于950mL水中，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节溶液pH 值到8.0,最后用水稀释至 1。2.2.13螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素磷酸盐、泰乐菌素酒石酸盐、红霉素、罗红霉素、交沙霉素标准品：纯度大于等于95%，参见附录B中表B.1。2.2.14七种大环内酯标准储备溶液：分别称取0.0100g标准品（2.2.13），分别用甲醇溶解定容至100mL，溶液浓度为100μg/mL，1℃～4℃冰箱保存。临用前根据需要用甲醇稀释至适当浓度，作为混合标准工作液，1℃～4℃冰箱保存。2.2.15标准工作曲线工作液：准确移取0.10mL七种大环内酯混合标准溶液，浓度分别为20 ng/mL，40ng/mL，200 ng/mL，400 ng/mL，500ng/mL，再加相应基质空白溶液0.9mL，混匀，相当于样品中含有 10 μg/kg,20 μg/kg,100 μg/kg,200 μg/kg,250 μg/kg 大环内酯。2.3仪器和设备2.3.1高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源。 SN/T 1777.2—20072.3.2旋转蒸发器。2.3.3固相萃取装置。2.3.4 离心机。2.3.5均质器。2.3.6旋涡混合器。2.3.7 pH计。2.3.8固相萃取小柱:C1:固相萃取小柱,500 mg,或相当者。5 mL 甲醇,5 mL水预洗。2.3.9无水硫酸钠柱：80mm×40mm（内径)筒形漏斗，底部垫5mm脱脂棉，再装50mm无水硫酸钠。2.4测定步骤2.4.1样品制备猪肉、禽肉、肝脏、肾脏：从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，用组织捣碎机充分捣碎a）均匀，均分成两份，分别装人洁净容器中，密封，并标明标记，于→18℃以下冷冻存放。蜂蜜：取500g代表性蜂蜜榨品未结晶的样品将其用力搅拌均匀，有结晶析出的样品可将样b)!品瓶盖塞紧后，置于不超过60℃的水浴中温热二等样品全部熔化后搅匀，迅速冷却至室温。在熔化时应注意防止水分挥发。制备好的试样均分成两份分别装人样品瓶中，密封，并标明标记，于常温下存放。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。2.4.2提取猪肉、禽肉、肝脏、肾脏样品称取‘5 g试样精确到0.0T-g)置于 50 mL具塞离心管中，加a）25mL乙腈，在均质器中以12000r/min均质30s，于3000r/min离心3min，将上层乙腈提取液过滤，收集于50m