Agilent1260高效液相作业指导书.docx

Agilent1260 高效液相作业指导书 目的 规范 Agilent1260 高效液相色谱仪的操作，有利于仪器的使用和检测工作的开展。 使 Agilent1260 高效液相色谱仪处于受控状态，保证检测结果的准确性和可靠性。 方便 Agilent1260 高效液相色谱仪的日常维护及常见故障的检查和解决。 范围 本作业指导书适用于 Agilent1260 液相色谱仪。3.职责 检验室负责制定操作规程。 仪器负责人组织实施操作规程并保证仪器的有效使用。 质量员保证仪器处于受控状态并负责编写仪器的检定、期间核查计划并组织落实实施 操作规程 开机 打开计算机，登陆 windows 操作系统。 打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器 联机”图标,进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制” 画面。 把各流动相放入溶剂瓶中。 旋开排气阀（逆时针），右单击“四元泵”图标出现快捷键，点击“方法”选项进入泵编辑画面。将泵流量设到3ml/min，溶剂A 设到 100%，打开泵，排出管线中的气体 2—3 分钟，直到管线内由溶剂瓶到泵入口无气泡为止,查看柱前压力 （若大于 10bar，则应更换排气阀内过滤白头）。依此切换到 B、C、D 溶剂分别排气。 将泵的流量设到 0.8ml/min，多元泵则再设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）。 再将泵的流量设到 0.8ml/min，2 分钟后将泵的流量设到 1.0ml/min，冲洗色谱柱 20—30 分钟。 把缓冲液换成流动相，待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯，观察基线情况。 数据采集方法编辑 编辑样品信息：由“运行控制”进入“样品信息”，设定操作者姓名，样品数据文件名等。 编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项.选中项单击“确定”入下一画面“方法注释”，编辑好单击“确定”进入下一画面“选 择进样源”，选中 Als 单击“确定”入下一画面“设置方法”进行参数设定。 四元泵参数设定：在“流速”处输入流量,如 1ml/min,在“溶剂”处选中B 输入 18%(A=100-B-C-D)，在右面注释栏中标明各溶剂的名称；设置“停止时间” 和“后运行时间”，在“压力限值”处输入柱子的最大耐高压以保护柱子如：400bar，在“时间表”添加编辑梯度。 进样器参数设定：在进样模式中输入进样量 xxul。“标准进针” ——只能输入进样体积此方式无洗针功能。“针清洗后进样” ——可以输入进样体积和洗瓶位置为 xx，此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。 进样器进样程序参数设定：选中使用进样程序，在“函数”中添加相应函数即可按程序进样。 TCC 检测器参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度,并选中它, 右侧选中“与左侧相同” ——使柱温箱的温度左右一致。 VWD 检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长,如 214nm, 在“ 峰宽( 响应时间) ” 下方点击下拉式三角框, 选择合适的响应时 间, 如0.1min(2s),再设置“停止时间”和“后运行时间”。 仪器曲线设置：默认即可。 数据处理 从“视图”菜单中单击“数据分析”进入数据分析画面 从“文件”菜单选择“调用信号”选中您的数据文件名，单击“确定”。 谱图优化,从“图形”菜单中选择“信号选项”从“范围”中选择“自动量程” 及合适的显示时间单击“确定”,或选择“自定义量程”调整,反复进行直到图的 比例合适为止。 积分:从“积分”中选择“自动积分”,积分结果不理想,再从菜单中选“积分事件”，选项选择合适的“斜率灵敏度,峰宽,最小峰面积,最小峰高”.从“积分”菜单中选择“积分”选项则数据被积分.如积分结果不理想则修改相应的积分参数直到满意为止。单击左边图标将积分参数存入方法。 校正表设计：点击“校正”菜单中的“校正设置”，给出各个参数：点击“确定”；调出建立校正表所需的谱图并对谱图进行图形优化和积分优化；点击“校正”菜单中的“新建校正表；在“新建校正表”栏里选定“自动设定”点击“确定”；在“校正表”中给出正确的“化合物名”和“含量”；如需增加校正点数，给出第二校正点的“含量”，校正表建立完成后点击“确定”，点击“保存图标”将校正表存入方法中。 打印报告:从“报告”菜单中选择“设定报告”选项进入画面:单击“定量结果” 框中“定量”右侧的黑三角选中“百分比法”面积百分比其它选项不变单击“确定”.从“报告”菜单中选择“打印”则报告结果将打印到屏幕上如想输出到打印机上则单击“报告”底部的“打印”钮。 关机 关机前，用 50%乙腈水冲洗柱子和系统 0.5—1 小时，流量 0.8—1.0ml/min， 再用 100%有机溶剂冲 0.5 小时，然后关泵。 退出化学工作站，及其它窗口，关