SN_T 2580-2010进出口蜂王浆中16种磺胺类药物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2580-2010进出口蜂王浆中16种磺胺类药物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of sixteen sulfonamides residues inroyal jelly for import and export-LC-MS/MS2010-05-27发布2010-12-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 2580—2010前言本标推按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标推由中华人民共和国浙江出人境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：谢文、陈笑梅、丁慧瑛、奚君阳、韩超、张慧敏。 SN/T 2580-2010进出口蜂王浆中16种磺胺类药物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了蜂王浆中16种磺胺类药物残留测定的制样和液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标适用于蜂王浆中磺胺嘧啶、磺胺噬唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺-5-（对）甲氧嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺-6-（间）甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺甲基异恶唑、磺胺二甲异恶唑、苯酰磺胺、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺喹嗯啉残留量的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要用甲醇沉淀样品中蛋白质，上清液用乙酸乙酯提取，再用MCX和C1s固相萃取小柱净化，液相色谱-质谱/质谱测定，内标法定量。4试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4.1乙睛：高效液相色谱级。4.2甲醇：高效液相色谱级。4.3乙酸乙酯：高效液相色谱级。4.4甲酸：高效液相色谱级。4.5氯化钠。4.6氨水25%~28%。4.75%氨水甲醇溶液：氨水-甲醇（5十95，体积比）。4.8磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺-5-（对）甲氧嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺-6-（间）甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺甲基异恶唑、磺胺二甲异恶唑、苯酰磺胺、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺喹嗯啉、磺胺嘧啶-D4、磺胺二甲基嘧啶-D4、磺胺二甲氧嘧啶-D4标准品：纯度大于等于98%，见附录A表A.1。4.9标准储备溶液：分别称取经折算适量标准品（4.8)（精确至0.1mg），分别用甲醇溶解定容至100mL，溶液浓度为100μg/mL，1℃～4℃冰箱保存。有效期3个月。4.10磺胺嘧啶-D4、磺胺二甲基啶-D4、磺胺二甲氧嘧啶-D4标准储备溶液：分别称取标准品（4.8），1 SN/T2580--2010分别用甲醇溶解定容至100ml，溶液浓度为100g/mL，1℃~4℃冰箱保存。4.11空白样品提取液：用不含16种磺胺药物的蜂王浆样品，按照第7章制备空白样品溶液。4.12标准工作溶液：根据需要用空白样品提取液（4.1.1）将标准储备液稀释成浓度为1ng/ml、1.25ng/mL、2.5ng/ml、5ng/ml.、12.5ng/mL.的混合标准工作溶液，相当于样品中含有4μg/kg、5μg/kg、10μg/kg、20ug/kg、50ug/kg磺胺类药物。内标溶液浓度均为1ng/ml。4.13MCX固相萃取小柱，500mg，3mL或相当者。使用前依次用5ml.甲醇，5mL水预洗。4.14Crs固相萃取小柱，500mg，3ml.或相当者，使用前依次用5ml.甲醇预洗。4.15微孔滤膜：0.45μm，有机相。5仪器和设备5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源5.2天平：感量为0.0001g和0.01g。5.3固相萃取装置。5.4离心机：大于等于6000r/min5.5旋涡混合器。5.6减压浓缩仪。5.7具塞离心管：聚四氟乙烯，50mL。6试样制备与保存取500g代表性蜂王浆样品，存温下解冻，鑫样品全融化后匀，将试样均分成两份，分别装人样品瓶中，密封，并标明标记。份作为试验样，-份在止18%保存。不在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。7测定步骤7.1提取称取2g试样（精确到0.01g）置系.5uml.暴离心管费，如.1mL同位素内标溶液（40ng/mL），和10mL水，混匀，静置2min，再加甲醇至20mL.于旋涡混合器上以2000r/min混匀1min，以6000r/min离心5min，移取10.0mL上清液，加10mL水，混匀，加2g氯化钠和20ml乙酸乙酯提取，下层溶液再用20ml乙酸乙酯提取一次，合并乙酸乙酯提取溶液，在45℃以下水浴中减压浓