SN 1134-2002进出口肉及肉制品中维吉尼霉素残留量检验方法 杯碟法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 1134--2002进出口肉及肉制品中维吉尼霉素残留量检验方法杯碟法Method for the determination of virginiamycin residuesin meats and meat products for import and export-Cylinder method2002-08- 02 发布2003-01-01实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局 SN /T 1134-2002前言本标准中的测定方法是采用日本厚生省1990年所编制的《畜、水产食品中的残留物质检验方法》中维吉尼霉素检验方法，其技术内容与原方法相同，具体操作方法稍加改动，经试验和验证后，按规定要求作了编辑性修改。本标准中同时制定了抽样和制样方法。测定低限是根据国际上对肉品中维吉尼素残留量和测定方法灵敏度而制定的。本标准的附录A是规范性附录，附录B是资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人：王素琴、何霖、孙俐、陈子红。本标准系首次发布的出人境检验检疫行业标准。 SN/T 1134—2002进出口肉及肉制品中维吉尼霉素残留量检验方法杯碟法1 范围本标准规定了进出口肉及肉制品中维吉尼素残留检验的抽样、制样和杯碟测定方法。本标适用于进出口冻鸡肉中维吉尼素残留量的检验。2抽样和制样2.1 检验批以不超过2500件为一检验批。同一检验批的商品应具相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。2.2抽样数量批量/件最低抽样数/件1~251526250251~1001~~2 5002.3抽样方法按2.2规定的抽样件数随机抽取，逐渐开启。每件至少一袋为原始样品。如每件中无小包装或有小包装，但每袋重量超过2kg，则可用灭菌刀从每件中割取不少于100g样品，混合后置于清洁容器内作为混合样品。原始样的总量不少2kg，加封后标明标记，及时送交实验室。2.4试样制备从原始样品中取出部分有代表性的样品，将可食部分用绞碎机绞碎，充分混勾，用四分法缩分至不少于500g，作为试样，装人清洁容器内，密封后，标明标记。2.5试样保存将试样于一18℃以下冷冻保存。注：在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染后发生残留物含量的变化。3测定方法3. 1方法提要用乙醇提取试样中残留的维吉尼素，经均质、离心后取上清液作为样液，取上清液与结膜干燥杆菌作用，根据产生抑菌圈直径大小，并查阅标准曲线，计算出样品中维吉尼霉素的残留量。1 SN/T 1134--20023.2试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水。本方法标准品及其标准溶液均以效价计。3.2.1 无水乙醇。3.2.2 无水甲醇。3.2.3甲醇+水(1+2)。3.2.4生理盐水：称取8.5g氮化钠，溶于1000mL水中，121C灭菌15min。3.2.5 磷酸二氢钾。3.2.6 磷酸氢二钠。3.2.7磷酸盐缓冲液（pH6.0)：称取3.5g磷酸二氢钾（精确至0.1g)溶于400mL水中，另外称取3.0g磷酸氢二钠（精确至0.1g）,溶于400mL水中，将两种溶液混合在一起定容至1000mL。3.2.8维吉尼舞素标准品。3.2.9维吉尼舞索标准贮备液：准确称取适量的维吉尼霉素标准品，用甲醇溶液(3.2.3)溶解后定容至50mL，配成1000μg/mL的维吉尼素标准贮备液，于4C保存，一周内使用。3.2.10维吉尼舞素标准工作液：吸取一定量的标准贮备液，用磷酸盐级冲液分别稀释成浓度为0. 025 μg/mL、0. 05 μg/mL、0. 1 μg/mL、0. 2 μg/mL、0. 4 μg/mL 和 0. 8 μg/mL 标准工作溶液,以上稀释均须当日配制。3.2.11实验菌种：结膜干燥棒杆菌（Corynebacterium xerosis）。3.2.12培养基I（见附录A1)。3.2.13培养基Ⅱ（见附录A2)。3.2.14培养基皿（见附录A3)。3.3仪器和设备游标卡尺：测量范围0mm～200mm，精度0.02mm，或抑菌圈测量仪。.2牛津杯:离10mm±0.1 mm,内径6.0mm±0.1 mm,外径8.0 mm±0.1mm。离心机：不低于3000 r/min。3.3.3恒温培养箱：30℃±1C，36C士1℃，50C±1C，隔板保持水平。.5高压灭荫器。绞碎机：不低于3000r/min。.7均质器：不低于10000r/min，带均质杯250ml。3.3.8培养Ⅲ：内径90mm，底部平整光滑的玻璃Ⅲ或塑料Ⅲ，并应配有陶瓦盖。3.3.9其他：玻璃板、吸管、毛细管等。3.4测定步骤3.4.1试液制备推确