SB 10389-2004肉与肉制品中山梨酸的测定.pdf

ICS 67. 120X 04SB备案号：14170—2004中华人民共和国国内贸易行业标准SB/T 10389---2004肉与肉制品中山梨酸的测定Determination of sorbic acid in meat and meat products2004-08-04发布2004-09-01实施发布中华人民共和国商务部玛防料 SB/T 10389—2004前 本标准由中华人民共和国商务部提出。本标准由商务部屠宰技术鉴定中心负责起草，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、河北省疾病预防控制中心参加起草。本标准主要起草人：金社胜、杨祖英、宋书锋、韩会新、张新玲、刘虎成、王贵际。本标推委托商务部屠宰技术鉴定中心负责解释。一 SB/T 10389—2004肉与肉制品中山梨酸的测定1范围本标准规定了肉与肉制品中山梨酸的测定方法。本标准适用于肉与肉制品中山梨酸的检验。2 原理样品中山梨酸经提取，用中性氧化铝净化后，进行高效液相色谱仪测定。3试剂和材料以下所用试剂,除特殊说明外,均为分析纯试剂，水为重蒸水。3.1甲醇：优级纯。3.2乙酸铵。3.3中性氧化铝：层析用，（100～200)目。3.40.02mol/L乙酸铵溶液：称取1.54g乙酸铵，加水溶解并稀释至1L。3.5山梨酸：99%（国家标准物质研究中心）。3.6山梨酸标准储备液：准确称取25.0mg山梨酸标准品，加少量乙醇溶解后，用水稀释并定容至25.0 mL,摇勾。此溶液每毫升含 1.0 mg山梨酸。于冰箱中,有效期15 天。3.7山梨酸标准中间溶液：吸取5.0mL山梨酸标准储备液于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，并摇匀。此溶液每毫升含50μg山梨酸。贮于冰箱中，有效期7天。3.8山梨酸标准系列溶液：分别吸取1.0,2.0,3.0，4.0,5.0mL山梨酸标准中间溶液于10mL容量瓶中，各加水至刻度，摇勾。即得每毫升含5.0,10.0,15.0,20.0，25.0μg山梨酸的标准系列溶液。4仪器和设备4.17高效液相色谱仪：附紫外检测器。4.2超声清洗器。4.3旋涡混匀器。4.4离心机。4.5旋转蒸发仪4.6微孔滤膜过滤器。5 测定步骤5.1试样处理取200g试样绞碎，称取约1.00g(精确至0.01g)试样，置于50mL塑料试管中,加5mL水，于旋涡混勾器混匀1min，超声提取15min，然后以 4000r/min离心20 min。柱层析：用一只10mL注射器，底部填少量脱脂棉，内装3cm高的中性氧化铝，先用水润湿中性氧化铝柱，待水面接近桂顶时，加人样品提取液，让其流下，待样品液液面接近柱顶时，用流动相洗脱，收集洗脱液至25mL容量瓶中，至刻度时，停止洗脱，摇匀，溶液通过微孔滤膜过滤，滤液进行HPLC分析。5.2色谱测定5.2.1 液相色谱参考条件a）色谱柱：HypersilODS2，250 mmX4.6 mm，粒径5 μm;1 SB/T 10389—2004b）流动相：0.02mol/L乙酸铵溶液+甲醇=100V+9V;c)流速:l.0 mL/min;d）检测波长：230 nm;e）柱温:室温。5.2.2山梨酸标准曲线的制备在上述色谱条件下进山梨酸标准系列溶液各20uL，以山梨酸标准溶液浓度对应的峰面积作标准曲线。样品测定5.2.3在上述色谱条件下，准确吸取20 μL试样溶液,进行HPLC分析。6 结果6.1 计算将标准曲线各点的浓度与对应的峰面积进行回归分析，然后按式(1)计算供试样品中山梨酸含量。X= cXVX1 000.(1)m × 1 000式中:X—-样品中山梨酸的含量，单位为毫克每千克(rng/kg);一被测液相当于标准曲线的山梨酸的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；V一-被测液的总体积,单位为毫升(mL);样品质量，单位为克（g）。m6.2检出限本方法检出限为2.0 μg/mL，当取样量为1.00g时，最低检测量为2.0 mg/kg。7允许差同一分析者同时或相继两次测定结果之差不得超过均值的15%。2 1026800L/AS中华人民共和国国内贸易行业标肉与肉制品中山梨酸的测定SB/T 10389—2004*中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码：100045网址 电话：6852394668517548中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销*开本 880×123001/16印张 0.5字数5千字2004年10月第一版2004年10月第一次印刷*如有印装差错由本社发行中心调换版权专有　侵权必究SB/T 10389-2004举报电话：（010