SN_T 0169-2010进出口食品中大肠杆菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0169-—2010代替SN 0169—1992,SN 0333—1994和SN/T 1059.2--2002进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法Determination of coliform, fecal coliform and Escherichia coliin food for import and export2011-05-01实施2010-11-01 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局码防饼 SN/T 0169--2010前 言本标准按照 GB/T 1.1一2009 给出的规则起草。本标准代替SN0169-1992《出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法》、SN0333-1994《出口食品中大肠杆菌（葡萄糖苷酶荧光)检验方法》和SN/T1059.2--2002《进出口食品中大肠菌群、大肠杆菌计数滤膜/MUG法》。本标准与SN0169—1992、SN0333—1994和SN/T1059.2--2002相比，主要技术变化如下：将原标准名称《出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法》、《出口食品中大肠杆菌（葡萄糖苷酶荧光)检验方法》和《进出口食品中大肠菌群、大肠杆菌计数滤膜/MUG法》整合修订为《进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法》；-SN0169—1992标准的范围不变，但SN 0333—1994和 SN/T 1059.2-2002标准的范围有限，因此，本标准将范围进行整合修订；一增加了规范性引用文件;一增加了术语和定义；-在设备和材料中删掉了乳钵和研棒，稀释瓶中增加了“其他适宜的容器”；-对液体样品 MPN法的检测修订为：液体样品接种量 1 mL以上者,用双料月桂基硫酸盐胰蛋白陈肉汤;接种量1mL及1mL以下者,则用单料月桂基硫酸盐胰蛋白陈肉汤;平板计数法中删去了计算公式；MPN值表增加了“95%置信区间”本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局、中华人民共和国内蒙古出人境检验检疫局、中华人民共和国天津出人境检验检疫局。本标准主要起草人：付宝莲、刘中学、侯丽萍、高飞本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN 0169—1992;SN 0333—1994;SN/T 1059.2—2002。 SN/T 0169--2010进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法1范围本标准规定了进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法。本标准中MPN法适用于进出口食品中大肠菌群粪太肠菌群和太肠杆菌的检验；平板计数法适用于进出口食品中大肠菌群的检验;葡萄糖苷酶荧光法适用于进出口食品（不包括贝类)中大肠杆菌的检验；滤膜/MUG法适用于进出口坊便面、膨化食品、矿泉水、饮料、牛奶（需用蛋白酶处理）、单晶糖和椒粒中大肠菌群和大肠杆菌的检验2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则SN/T1538.2培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南3　术语和定义下列术语和定义适用于本文件3. 1大肠菌群　coliform需氧及兼性厌氧,能在37℃l48h分解乳糖产酸产群革兰氏阴性无芽孢杆菌。气的3. 2粪大肠菌群　fecal coliform需氧及兼性厌氧,能在 44.5℃土0.5℃,24h发酵乳糖产酸产气的一群革兰氏阴性无芽孢杆菌，该菌又可称耐热大肠菌群(thermotolerantcoliformorganisms)3.3大肠杆菌 Escherichia coli需氧及兼性厌氧，能在44.5℃±0:5℃ 48h分解乳糖产酸产气,生化特征IMViC”为“+十一一或一”的一群革兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌又可称大肠埃希氏菌。4检验方法4.1＇原理4.1.1最可能近似值(most probable number,MPN)法MPN法是统计学和微生物学结合的一种定量检测法。待测样品经系列稀释并培养后，根据其未生长的最低稀释度与生长的最高稀释度，应用统计学概率论推算出大肠菌群、粪大肠菌群或大肠杆菌在 SN/T 0169—2010待测样品中的最大可能数。4.1.2平板计数法大肠菌群在固体培养基中发酵乳糖产酸，在指示剂的作用下形成可计数的红色或紫色，带有或不带有沉淀环的菌落。4.1.3β-葡萄糖苷酶荧光法大肠杆菌中的 β-葡萄糖苷酶可降解培养基中 4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖苷酸（MUG),并释放 4-甲基伞形酮荧光物质（4-MU），该物质在紫外灯（波长366nm)下会显现蓝色