实验一常用玻璃器皿的清洗及包扎.docVIP

试验一 常用玻璃器皿的清洗及包扎 一.目的与规定 熟悉微生物试验所需多种常用器皿的名称和规格。 学会对的的清洗玻璃器皿的措施和包扎措施 二.原理 为了包装试验顺利进行，规定把试验用器皿清洗洁净，保持灭菌后无菌状态，需要对培养皿、吸管等进行妥善包扎，试管和三角瓶要做棉塞。清洗措施根据试验目的、器皿的种类、所盛放的物品、洗净剂的类别和沾污程度等的不一样而有所不一样，不一样的器皿包扎措施也不一样。 三.材料与仪器 （一）常用的多种玻璃器皿。 （二）洗涤工具和去污粉、肥皂、洗涤液。 四.操作环节 （一）清洗 1.新玻璃器皿的清洗 新购置的玻璃器皿均具有游离碱，故应先将其浸于洗液或2%的盐酸溶液中数小时，再用自来水冲洗洁净。 2.用过的玻璃器皿的清洗 （1）试管、培养皿、三角烧瓶、烧杯 可用瓶刷或海绵沾上肥皂、洗衣粉或去污粉等洗涤剂刷洗，然后在用自来水充足冲洗洁净。经洗涤后，若内壁的水均匀分布在一薄层，表达油垢完全洗净，若挂有水珠，则需用洗涤液（或洗液）浸泡数小时，再用自来水充足冲洗，洗涤洁净的器皿倒置与铁丝框内或有空心格子木架上，室内晾干。 （2）玻璃吸管、滴管 一般用完后应立即用清水和蒸馏水浸泡（或冲洗），省得干燥后难以冲洗洁净，如附有污物可用洗液浸泡。 （3）载玻片与盖玻片 带有油污的应擦去有无后用热乙醇、丙酮、二甲苯等溶液浸泡10~15min，溶液油垢然后用水冲洗，再用洗涤液浸泡、冲洗，干后置于95%乙醇中保留备用。 （二）玻璃器皿的包扎 1.培养皿 常用旧报纸或牛皮纸包紧，一般以5~10套培养皿作一包。包好后进行干热或湿热灭菌，如将培养皿放入金属（不锈钢）筒内进行热灭，则不必用纸包。 2.试管和三角瓶 试管管口和三角瓶都需要塞以棉花塞（或泡膜塑料塞），棉花塞的作用是起过滤作用，防止空气中的微生物进入试管或三角瓶。棉花塞的制作规定使用棉花塞紧贴玻璃壁，没有皱纹和缝隙，不能过紧也不能过松，长度不少于管口直径的二倍，约2/3塞进管口。若干支试管用绳扎在一起，在棉塞部分外包裹牛皮纸或2层旧报纸，再扎好。 三角瓶每个单独用牛皮纸或旧报纸包扎棉塞。 3.吸管 洗净烘干后的吸管，在口吸的一端月0.5cm处，用尖头镊子或针塞入少许脱脂棉，以免使用时将杂菌吹入其中，或不慎将微生物吸出管外，棉花要塞得松紧恰当。然后分别将每支吸管尖端斜放在旧报纸的近左端，以45度左右的角度螺旋形卷起来，右端多出的报纸大一小结，不使散开。 五、试验汇报 （一）成果 检查试验效果 （二）思索题 1.能否用橡皮塞、木塞来替代棉塞，为何？ 2.玻璃器皿清洗时应注意什么？ 试验二 一般光学显微镜的构造和使用 一、 目的与规定 （一） 学习一般光学显微镜的构造、部分功能及使用措施。 （二） 学习并掌握油镜的原理的使用措施。 二、 原理 一般光学显微镜由机械装置和光学系统2大部分构成。在光学系统中物镜的性能最为关键，它直接影响着显微镜的辨别率。而在一般光学显微镜中配置的几种物镜以油镜的放大倍数最大，与其他物镜相比，使用较特殊，需在载玻片与镜头之间加滴镜油，以增长照明亮度和提高辨别率。 三、 材料与仪器 （一）菌种 金黄色葡萄球菌及枯草杆菌染色玻片标本，啤酒酵母水浸片。 （二）其他 香柏油、二甲苯、显微镜、擦镜纸。 四、操作环节 （一）显微镜的安顿 置显微镜于平整的试验台上，镜座距试验台边缘3~4cm，镜检时姿势要端正。 （二）调整光源 安装在镜座内的光源灯可通过调整电压以获得合适的照明亮度，而使用反光镜采集自然光或灯光作为照明光源时，应根据光源的强度及所用物镜的放大倍数选用凹面或平面反光镜并调整其角度，使视野内的光线均匀，亮度合适。 （三）低倍镜观测 将标本玻片置于载物台上，用 标本夹夹住，移动推进器使观测对象处在物镜的正下方，下降10×物镜，使其靠近标本，用粗调整器（粗调螺旋）慢慢升起镜筒，出现图像后，再用细调整器（细调螺旋）调整图像至清晰。通过标本夹推进器慢慢移动玻片，认真观测标本各部位，找到合适目的物，仔细观测。 （四）高倍镜观测 在低倍镜下找到合适的观测目的并将其移至视野中心后，转动物镜转换器将高倍镜移至工作位置，对聚光器光圈及视野亮度进行合适调整后微调细调整器使物象清晰，运用推进器移动标本仔细观测并记录。 （五）油镜观测 在低倍镜或高倍镜下找到要观测的样品区域后，用粗调整器将镜筒升高约2cm，然后在待观测区域滴加1~2滴香柏油，将油镜转到工作位置，从侧面注视，用粗调整器将镜筒小心地降下，使油镜浸在镜油中并几乎与标本相接，将聚光器升至最高位置并开足光圈，用粗调整器将镜筒渐渐上升，直至视野中出现物象并用细调整器使其清晰为止。 （六）显微镜用后处理 1.上升镜筒，取下载玻片。