山羊副流感病毒3型检测技术规程.docxVIP

DB32/T ××××—2019 PAGE 3 山羊副流感病毒3型检测技术规程 范围 本标准规定了山羊副流感病毒3型（Caprine paraifluenza virus 3, CPIV3）的病原学检测（病毒核酸的RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测）、血清学检测（血凝抑制（HI）试验）的技术要求。 本标准适用于山羊副流感病毒3型及其感染情况的实验室检测。 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修订单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 19489 实验室生物安全通用要求 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 病原学检测 3.1 材料 微量移液器及吸头、DEPC水处理的离心管、吸头、PCR扩增管、TRIzol试剂、三氯甲烷、异丙醇、DEPC处理水（用水符合GB/T 6682规定）、反转录酶/Taq DNA聚合酶混合液、2×一步法RT-PCR反应缓冲液、一步法荧光定量RT-PCR试剂盒、TAE缓冲液、琼脂糖、核酸染料、引物MF/MR、引物qMF/qMR与探针（附录A）。 3.2 仪器设备 PCR仪、荧光定量PCR仪、台式冷冻离心机、电泳仪和水平电泳槽、凝胶成相仪（或紫外透射仪）。 3.3 反转录-聚合酶