SCT 2047-2006水产养殖用海洋微藻保种操作技术规范.pdf

ICS 65.150B 51SC中华人民共和国水产行业标准SC/T产养殖用海洋微藻保种操作技术规范Technical specification for germplasm grade and preservationof marine microalgae using in aquaculture2006-10-01实施2006-07-10 发布中华人民共和国农业部5发布 SC/T 2047—2006前言本标准的附录 A、D、E是规范性的,其余是资料性的。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产养殖标准化技术委员会海水养殖分技术委员会归口。本标准起草单位：苏州大学、江苏省海洋水产研究所。本标准主要起草人：陈葵、陈淑吟、吉红九、沈颂东、贺丽红。I SC/T 2047—2006水产养殖用海洋微藻保种操作技术规范1范围本标准给出了水产养殖中常用海洋微藻保种的术语和定义、设施设备和条件、基本操作与日常管理、藻种来源和分离纯化、藻种保存培养、室内小型扩增培养及藻种种质库的建立与管理方法。本标准适用于附录A所列水产养殖用海洋微藻的保种。其他海洋浮游微藻可参照执行。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB11607渔业水质标准3术语和定义3.1水产养殖用海洋微藻marine microalgae using in aquaculture用于水产养殖动物苗种培育、动物性饵料生物、经济双壳类成体的饵料、净化水质的海洋单细胞藻类,水产养殖常用海洋微藻种类参见附录A。3.2藻种 microalgae species具有良好特征性状,新鲜无污染，细胞密度在105个/mL～107个/mL之间的微藻单种或纯种。3.3接种 inoculation在无污染的条件下，把选中的藻种放人新备好的培养基中的操作。3.4单种培养xenic culture培养过程中,海洋微藻的培养系统内含有细菌(或不含细菌)和要培养的海洋微藻而没有其他生物。3.5封闭式培养closed culture藻类培养在封闭的容器中，只通过充气管、培养液加人管和藻液抽出管与外界接触。3.6一次性培养batch culture指在有限容积的培养容器中,加人定量培养液，接入藻种,藻细胞生长繁殖达到较高密度时，不加人或不更换培养液，一次性全部收获的培养方式。3.7半连续培养semi-continuous culture指在一次性培养的基础上，藻细胞生长繁殖达到较高密度时，收获部分藻液，置换等量的培养液，再1 SC/T 2047—2006培养再收获的培养方式。3.8连续培养continuous culture指使用封闭式自动培养装置，当培养容器中藻细胞密度超过规定数值，藻液自动流出，新培养液同时流人，自动化仪器不断调整流出率，保持藻液细胞密度相对稳定的培养方式。3.9继代培养subculture保种培养过程中,经过一定时间之后,把藻种接种在新培养基上,先放置在适宜条件下生长一段时间后,再放人低温(5℃～8℃）、弱光(50Ix～2001x)条件下，一代一代培养下去的方法，接种一次可保藏3个月～12个月。4设施设备和条件4.1水质符合 GB 11607。4.2设施设备4.2.1海水处理设施室外蓄水池、沉淀池、暗沉淀池或砂滤设备、通人室内的输水管道。4.2.2清洗消毒间用于容器和器材的清洗消毒，可分清洗间与消毒间。配有清洗消毒水槽、不同规格玻璃器Ⅲ、玻璃器皿放置架、臭氧紫外线消毒柜、烘箱、紫外线灯、工作台、电炉或煤气灶，高压蒸汽灭菌锅及载物架等。4.2.3培养操作间进行培养液的配制及微藻的保种、培养及检查等操作的房间。配有pH计、分光光度计、化学试剂、药品柜、电子天平、光学显微镜、超净工作台、无菌室等。4.2.4保种间用于放置低温培养箱、恒温光照培养箱、冰箱、冰柜，保存藻种、存放浓缩藻液的房间。4.2.5小型扩增培养间进行微藻小型扩增培养的具有控温设施的房间。要求房间采光、通风良好。配置气泵、带人工光源的培养架、遮光帘等。5消毒灭菌和营养液配制5.1 消毒5.1.1 微藻分离、保存用的海水在使用前需经灭菌处理。一般煮沸 5 min～10 min,用保鲜膜封口,冷却至室温后备用。5.1.2玻璃器Ⅲ用洗液或稀盐酸泡洗5min～10min,再用清水冲净，倒置凉于，放人烘箱，120℃～160℃灭菌 1 h～2 h。5.1.3有培养基的器血先去掉培养基再按5.1.2的要求洗涤。5.1.4其他不易清洗的容器，先刷洗干净，再按5.1.2的要求冲洗。5.1.5不