SNT 2289-2009进出口化妆品中氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 2289--2009进出口化妆品中氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of chloramphenicol, thiamphenicol and florfenicol incosmetics for import and export--LC-MS/MS method2009-09-01实施2009-02-20 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局然美数码防伪， SN/T 2289—2009前言本标准的附录 A 和附录 B均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国浙江出人境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：谢文、奚君阳、陈春、钱艳、陈笑梅。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T 2289—2009进出口化妆品中氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了化妆品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于洗面奶、面霜、爽肤水中氯霉素、甲砜霉素和氟甲霉素的检测。2方法提要用甲醇提取样品中氯霉素、甲砜霉素和氟甲砜霉素，液相色谱-质谱/质谱测定和确证，外标法定量。3试剂和材料水为二次蒸馏水。3.1甲醇:高效液相色谱级。3.2甲醇水溶液（2十8,体积比）：20mL甲醇加水稀释至100mL。3.3氯霉素标准品（chloramphenicol,CAS 号 56-75-7,C1 H12Cl2 N2Os）:纯度大于等于 99%。3.4甲砜霉素标准品（thiamphenicol,CAS号15318-453,C12H1sCl2NOsS)：纯度大于等于 99%。3.5氟甲砜霉素标准品（florfenicol,CAS号 76639-94,C12H15Cl2NO;S)：纯度大于等于 99%。3.6标准储备溶液：分别称取适量标准品，用甲醇溶解，溶液浓度为100 μg/mL。1℃～4℃冷藏保存。3.7混合标准储备溶液：分别移取适量标准储备溶液（3.6），用甲醇稀释，溶液浓度为1 ug/mL。1℃～4℃冷藏保存。3.8混合标准工作溶液：根据需要用甲醇水溶液(3.2)将混合标准储备溶液稀释成标准工作溶液。4仪器和设备4.1高效液相色谱-质谱仪：配有电喷雾离子源。4.2旋涡混合器。4.3·高速离心机：7000 r/min。4.4　分析天平：感量分别为0.01g和0.0001g。4.5 离心管。4.60.45μm有机相滤膜。5 测定步骤5.1样品处理称取1 g试样(精确到 0.01 g)置于 50 mL具塞离心管中,加入 20 mL 甲醇,于旋涡混合器上以2 000 r/min,混匀 1 min，以 6 000 r/min 离心 5 min,移取 1.00 mL。移取 1.00 mL(样液 A)用甲醇水溶液定容至10mL，混匀，过0.45 μm滤膜，供液相色谱-质谱/质谱仪测定。5.2 测定5.2.1液相色谱条件a）色谱柱:C：柱,150 mmX4.6 mm(内径）,5 μm 或相当者； SN/T 2289-—2009b）流动相：甲醇-水，梯度洗脱程序见表1；表 1流动相梯度洗脱程序水/%甲醇/%时间/min6535025754255. 9756563535658c)流速:400 μL/min;d)进样量：20μL质谱条件5.2.2a)离子源：电喷雾离子源；b)扫描方式：负离子扫描；检测方式：多反应监测;c)雾化气、气帘气、辅助气、碰撞气均为高纯氮气；使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测要d)求,参考条件见附录 A;监测离子对见附录 A表 A.e)5.2.3液相色谱串联质谱测定根据试样中被测样液的含量情况，选取待测物的响应值在仪器线性响应范围内的浓度进行测定，如超出仪器线性响应范围应进行稀释。在土述色谱条件下甲砜霉索~氟甲砜霉素和氯霉素参考保留时间约为 4.5 min、4.9 min 和 6.1 min,标准溶液的选择性离子流图参见附录 B中图 B.1。5.2.4液相色谱-质谱/质谱确证按照液相色谱-串联质谱条件测定梓品和标准工作溶液，样品中待测物质的保留时间与标准溶液中待测物质的保留时间偏差在士2.5%乏内。定量测定时采用标准曲线法测定。定性时应当与浓度相当标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差木超过表/2规定的范围;测可判断样品中存在对应的E被测物。表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差20~5610~201050相对离子丰度/%±25±30±50±20允许的相对偏差/%5.2.5 空自试验除不加试样外，均按上述操作步骤进行 结果计算和表述6用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中氯霉素或甲砜霉素或氟甲砜霉素含量，计算结果需扣除空白