NYT 1649-2008水果、蔬菜中噻苯咪唑残留量的测定 高效液相色谱法.pdf

ICS 65.100B 17NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1649-2008水果、蔬菜中噻苯咪唑残留量的测定高效液相色谱法Determination of thiabendazole residue in fruits and vegetables by HPLC2008-08-10实施2008-07-14发布中华人民共和国农业部发布 NY/T 1649--2008前言本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：农业部农产品质量监督检验测试中心（杭州）。本标准主要起草人：张玉、王强、王小骊、徐丽红、王、徐俊锋、陈笑芸。 NY/T 1649-—2008水果、蔬菜中噻苯咪唑残留量的测定高效液相色谱法1 范围本标准规定了水果、蔬菜中噻苯咪唑(噻菌灵)残留量的高效液相色谱测定方法。本标准适用于水果、蔬菜中噻苯咪唑(噻菌灵)残留量的测定。本标准方法检出限为 0.01mg/kg。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理样品中噻苯咪唑经甲醇提取后，根据噻苯咪唑在酸性条件下溶于水，碱性条件下溶于乙酸乙酯的原理，进行净化，再经反相色谱分离，紫外检测器300nm检测，根据保留时间定性，外标法定量。4 试剂与材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T 6682一级的水。4.1 甲醇,色谱纯。4.2 乙酸乙酯。4.3氯化钠(NaCl)。4. 4 盐酸溶液Ec(HCl)=0.1 mol/ L]:吸取 8.33 mL 盐酸(HCI),用水定容至 1 L。4.5氢氧化钠溶液Lc(NaOH)=1.0mol/L]:称取 40g氢氧化钠(NaOH),用水溶解,并定容至1 L。4.6无水硫酸钠（Naz SO4）：650℃灼烧4h，干燥器中保存。4.7噻苯咪唑(thiabendazole):纯度大于 99%。4.8标准贮备液(100mg/L)：准确称取噻苯咪唑0.0100g，用甲醇(4.1)溶解后，定容至100mL。置4℃保存,有效期3个月。5仪器与设备5.1高效液相色谱仪，配有紫外检测器。5.2分析天平:感量 0.01 g和 0.1 mg。5.3组织捣碎机。5.4 旋转蒸发仪。5.5机械往复式振荡器。5.6 布氏漏斗。1 NY/T 1649--20086试样制备将水果、蔬菜样品取可食部分，用干净纱布轻轻擦去样本表面的附着物，采用对角线分割法，取对角部分，将其切碎，充分混匀，用四分法取样或直接放人组织捣碎机中捣碎成勾浆。将试样分为两份，一份供检测，一份备用。匀浆放人聚乙烯瓶中于20℃～一16℃条件下保存。7 分析步骤7.1提取及净化称取10g样品，精确至0.1g,放人250mL平底锥形瓶中，加40.0mL.甲醇（4.1），在机械往复式振荡器上振摇20min，布氏漏斗抽滤，并用适量甲醇洗涤残渣2次，合并滤液，在50℃下减压蒸发至剩余5mL～10 mL,用20.0 mL盐酸溶液(4.4)洗人 250 mL分液漏斗中,加人20.0 mL乙酸乙酯（4.2)振荡静置，乙酸乙酯层再用20.0mL盐酸溶液(4.4)萃取一次。合并水相用氢氧化钠溶液(4.5)调pH至8~～9,加人4g氯化钠(4.3），移人分液漏斗中，用40.0 mL乙酸乙酯分别萃取2次；合并乙酸乙酯，经无水硫酸钠(4.6)脱水,在50℃下减压旋转蒸发近干,残渣用流动相溶解并定容至5mL,经0.45μm滤膜过滤后待测。7.2液相色谱参考条件色谱柱:C18，3.9mm×150 mm(5μm)或相应类型色谱柱。流动相：甲醇十水一50十50。流速:1.0 mL/min。检测波长：300nm。柱温：室温。进样量：10 μL。7.3标准工作曲线吸取标准储备液(4.8)0、0.10、0.50、1.00、2.00mL，用流动相定容至10mL，此标准系列质量浓度为0、1.0、5.0、10.0、20.0 mg/L.绘制标准曲线。7.4测定将标准工作溶液和待测液分别注人高效液相色谱仪中，以保留时间定性，以待测液峰面积代人标准曲线中定量，同时做空白实验。8 结果计算试料中噻苯咪唑残留量以质量分数w计，单位以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式(1)计算：xV:(1)m式中：β—由标准曲线得出试样溶液中噻苯咪唑的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L);V—最终定容体积,单位为毫升(mL);m—试样质量,单位为克(g);计算结果保留到小数点后两位。9精密度在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术