NY_T 2692-2015奶牛隐性乳房炎快速诊断技术.pdf

ICS 11.220B 41NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2692—2015奶牛隐性乳房炎快速诊断技术Rapid diagnostic techniques for subclinical mastitis in dairy cow2015-02-09 发布2015-05-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 2692—2015前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由中国动物防疫标准化技术委员会（SAC/TC181)归口。本标准起草单位：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所。本标准主要起草人：李新圃、罗金印、李宏胜、杨峰、李建喜、杨志强。I NY/T 2692-—2015奶牛隐性乳房炎快速诊断技术1范围本标准规定了奶牛隐性乳房炎快速诊断技术。本标准适用于奶牛场泌乳牛的隐性乳房炎现场诊断，但不包括干奶前2周和分娩后1周的泌乳牛。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2. 1隐性乳房炎subclincialmastitis亚临床型乳房炎（乳腺炎）。奶牛乳腺组织的一种炎症，无肉眼可见的病理变化，但乳汁理化性质已发生明显变化。由于炎症向局部组织浸润，乳汁中的体细胞数量异常升高，高于50万个/mL。2. 2 乳汁体细胞somatic cellsinmilk乳汁中的体细胞主要由中性粒细胞、淋巴细胞和上皮细胞组成。健康泌乳牛乳腺中的体细胞数量很少，发生乳房炎时，大量中性粒细胞以及淋巴细胞从血液向乳腺迁移，同时乳腺组织受损，加剧了上皮细胞的脱落，致使乳汁中的体细胞数量异常升高。2. 3快速诊断技术rapid diagnostic techniques是一种便于现场操作及在较短时间检测出结果的技术。3诊断原理以阴离子表面活性剂为主要成分的诊断液与新鲜乳汁混合，破坏乳汁中的体细胞，释放出细胞核中的DNA,遇水形成黏度很高的DNA高分子水化物。乳房炎的炎症越严重，乳汁体细胞数越多,形成的高黏度DNA高分子水化物也越多。4诊断材料4.1诊断液4.1.1组成十二烷基硫酸钠180 g直链烷基苯磺酸50 g硼酸5g溴甲酚紫0. 4 g氢氧化钠溶液100g/L蒸馏水加至1 000 mL注：组成成分应使用化学纯试剂，当没有试剂级别时，可以使用高纯度的化工原料。4.1.2制备按组成配比，将十二烷基硫酸钠、直链烷基苯磺酸、硼酸、溴甲酚紫溶解在500mL蒸馏水中，用100g/L氢氧化钠调至绛紫色（pH7.0～9.0）,加蒸馏水至1000mL,混匀即可。1 NY/T2692—20154.2诊断盘为白色或乳白色聚氯乙烯（PVC)塑料材质，由1个手柄和4个检验杯组成。杯和杯之间留有10mm左右的间隙，每个检验杯的高度在15mm左右，内径在70mm左右，用于采集乳样、混合乳样和诊断液、观察诊断结果。测试后，用常水冲洗干净，以便继续使用。5诊断方法操作及判断：a）1份诊断液用4份蒸馏水或纯净水稀释备用；b）弃去泌乳牛头两把乳，将4个乳室的乳汁按一定顺序分别挤入诊断盘的4个检验杯中；c）将诊断盘倾斜60°角弃去多余乳样，使杯中保留乳汁约2mL，加入稀释诊断液2mL；d)在光线明亮处，水平同心圆旋转摇动诊断盘5s～30s，使诊断液与乳汁充分混合；e）按表1的判断标准，在60s内判断结果。6成品诊断液可直接选购成品诊断液及配套诊断盘：a）诊断液按产品说明书使用，判断标准应与表1相符；b)产品及质量标准参见附录A；c)包装、标志和使用说明书参见附录B。表 1诊断液检测隐性乳房炎的判断标准隐性乳房炎体细胞数(SCC)范围诊断液与乳汁的混合反应诊断结果万个/mL阴性(一)SCC50旋转摇动诊断盘时，混合物呈均匀的液态；倾斜诊断盘时，底部无沉淀旋转摇动诊断盘时，混合物中有少量稀薄沉淀物；倾斜诊断盘时，沉淀弱阳性（十）)50SCC150物散布于底部有一定黏附性旋转摇动诊断盘时，混合物中的沉淀物多而黏稠，有向中心聚集的倾阳性（十十)150SCC≤500向；倾斜诊断盘时，沉淀物黏附于底部流动慢旋转摇动诊断盘时，混合物中的沉淀物大部分或全部呈明显胶状，向SCC500强阳性（十十十）中心聚集成团；倾斜诊断盘时，沉淀物几乎完全黏附于底部难以流动2 NY/T 2692—2015附录A(资料性附录)诊断液的质量标准A.1诊断液产品LMT、BMT、HMT、CMT 等”。A.2符合率奶牛隐性乳房炎诊断液是一种间接乳汁体细胞计数法，与NY/T800-2004规定的显微镜法和乳汁体细胞计数仪法（包括电子粒子技术体细胞仪和荧光光电计数体细胞仪）比较，其诊断符合率应符合表A.1的要求。表A.1诊断液的符合率体细胞数（SCC）范围与显微镜法比较与细胞计数仪法比较诊断结果万个/mL%%乳房炎阴性（一）≥90SCC50≥90乳房炎弱阳性(十)50SCC