SN_T 5114-2019进出口食用动物、饲料氟苯尼考（氟甲砜霉素）测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

ICS 65.020B 43SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 5114---2019进出口食用动物、饲料氟苯尼考（氟甲砜霉素）测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of chloramphenicol in live animals and feeds for import andexport - LC-MS/MS method2019-09-03 发布2020-03-01实施学中国海研出版社有限公司话 H华人民共和国海关总署发布刮开涂层激活密码 SN/T 5114--2019前 言本标准按照 GB/T 1.1--2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津海关。本标准主要起草人：董志珍、李淑静、赵光洲、肖研、张永年、朱建民。1 SN/T 5114—2019进出口食用动物、饲料氟苯尼考（氟甲霉素）测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了进出口食用动物、饲料中氟苯尼考的检测方法。本标准适用于出人境检验检疫工作中动物血清(牛、羊、猪、鸡）、尿液（牛、猪、羊)和预混合饲料、配合饲料、浓缩饲料中氟苯尼考的检测。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682　分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3方法原理采用乙腈、二氯甲烷、碱化乙酸乙酯分别提取血清、尿液、饲料中的氟苯尼考，经液相色谱-质谱/质谱法测定。4试剂和材料4.1甲醇：色谱纯。4.2乙酸乙酯：色谱纯。4.3磷酸二氢钠：分析纯。4.4二氯甲烷：分析纯。4.5乙腈:色谱醇。4.6氢氧化钠：分析纯。4.7标准物质:氟苯尼考(参见附录 A),纯度≥95%。4.8标准储备液：0.1 mg/mL。称取 4.7所述标准物质，用甲醇（4.1)配成0.1 mg/mL的标准储备溶液，—15℃～-20℃保存。4.9标准工作溶液：1.0 μg/mL。吸取 4.8所述标准储备溶液1mL于100 mL容量瓶中，用甲醇(4.1)定容至刻度,2℃～8℃保存。4.10pH7.0磷酸盐缓冲溶液：称取0.68g磷酸二氢钠(4.3)、0.1164g氢氧化钠(4.6)溶于100mL水中。4.1150 mL具塞离心管。4.12 0.22 μm滤膜。4.13水：GB/T 6682规定的一级水。5.仪器和设备5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源。1 SN/T 5114—20195.2天平：感量分别为0.01g和0.0001g。5.3氮吹浓缩仪。5.4　高速冷冻离心机(最高转速可达10000r/min)。6　样品的采集与保存6.1血样的采集采集动物血样，待自然凝固后离心分离取上清为血清，分装于小管，加盖密封。6.2尿样的采集采集动物尿样，于4℃，3000r/min离心10 min后，上清液分装于小管，加盖密封。6.3饲料的采集样品的采集按照GB/T14699.1的规定进行。样品的制备按照GB/T20195的规定进行。6.4·试样的保存将分装后的血清、尿样于一15℃～一20℃保存。7 测定步骤7.1提取7.1.1血清试样称取约0.50g血清（精确至0.01g)于15mL离心管中,再加人5.0mL乙腈（4.5），超声提取5min，5 000 r/min离心5 min，取上层清液（乙腈层），过0.22um滤膜，待测。7.1.2尿样称取约1.00g尿样(精确至0.01g）,加人适量氨水调节 pH一9.5,再加人5.0mL二氯甲烷（4.4)，涡旋3 min,5000 r/min离心5 min,取二氯甲烷层（下层)置于15 mL离心管中，40℃土1℃水浴氮吹至近干,以 1.0 mL水复溶,过 0.22 μm滤膜(4.12),待测。7.1.3饲料称取约1.00g饲料（精确至0.01g），加入4.0mL磷酸盐缓冲溶液（4.10），加入10mL氨水碱化乙酸乙酯（4.2)（乙酸乙酯：氨水=98：2），涡旋3 min,5000 r/min 离心5 min,取乙酸乙酯（上层）置于50 mL离心管中,重复提取 1次,合并两次提取液，40 ℃士1 ℃水浴氮吹至近干，以 1.0 mL水复溶,过0.22 μm 滤膜,待测。7.2工作曲线的配制分别吸取10μL、50μL、100μL、200μL、500μL标准工作溶液（4.9)，依次加人相应试剂瓶中，用水定容至 1.0 mL,获得 0.01 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL 和 0.50 μg/mL 的系列标准溶液。2 SN/T 5114—20197.