SN_T 0350-2012出口水果中赤霉素残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0350—2012代替SN0350-1995出口水果中赤霉素残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of gibberellic acid residues in fruit forexport—LC-MS/MS2012-1116 实施2012-05-07 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 0350-—2012前言本标准按照GB/T1.1--2009给出的规则起草。本标准代替SN0350--1995《出口水果中赤舞素残留量检验方法》。本标准与SN0350—1995相比，主要技术变化如下：方法名称、封面、前言部分、检测方法等；删去了抽样部分。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国浙江出人境检验检疫局。本标主要起草人：谢文、郑自强、钱艳、丁慧瑛、叶嘉明、石蕾、吕春华。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN 0350--1995.1 SN/T 0350--2012出口水果中赤霉素残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了水果中赤霉素残留量的制样和液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于出口苹果、桔子、桃子、梨和葡萄中赤霉素残留量的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682　分析实验室用水规格和试验方法3方法提要用乙睛提取试样中残留的赤霉索，提取液经液液分配净化后，用液相色谱-质谱/质谱测定和确证，外标法定量。试剂和材料4除另有规定外，所有试剂均为分析纯，永为GB/T.6682规定的一级水。4.1 乙腈:色谱级。4.2甲醇:色谱级。4.3乙酸乙酯：色谱级。4.4甲酸:色谱级。4.5磷酸二氢钾。4.6氢氧化钠。4.7 硫酸。4.8氯化钠。4.9硫酸水溶液（pH2.5):1滴硫酸加人100mL水中，调节水pH为2.5。4.10磷酸盐缓冲溶液(pH7):6.7g磷酸二氢钾和1.2g氢氧化钠溶解于1L水中。4.110.15%甲酸溶液:移取 0.15 mL甲酸,用水稀释至 100 mL。4.12赤霉素标准品(Gibberellic acid，CAS 号:77-06-5，CigH2O.）:纯度大于或等于 98%。4.13赤霉素标准储备溶液：称取适量标准品（4.12），用甲醇溶解，溶液浓度为 100 μg/mL。0℃～4 ℃ 冷藏避光保存。有效期3个月。4.14标准工作溶液：根据需要用空白样品溶液将标准储备液稀释成 4 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL和150 ng/mL的标准工作溶液,相当于样品中含有8 μg/kg、10 μg/kg、20 μg/kg、200 μg/kg、300 μg/kg赤霉素。临用前配制。4.15有机相微孔滤膜:0.45μm。1 SN/T 0350--20125仪器和设备5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源。5.2 分析天平:感量 0.1 mg,0.01 g。5.3 pH计。5.4旋转蒸发器。5.5旋涡混合器。5.6 离心机:4 000 r/min。6试样制备与保存从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，用粉碎机粉碎，混合均匀，均分成两份，分别装人洁净容器作为试样。密封,并标明标记。将试样于一18℃冷冻保存。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。7 测定步骤7.1提取称取5g试样(精确到0.01g)置于50mL塑料离心管中，加人25 mL乙腈和2g氯化钠，涡旋1 min，以4 000 r/min离心5 min。将上层乙提取液转移至浓缩瓶中，下层溶液再用20 mL乙腈提取一次，合并乙腈提取液，在 45℃以下水浴减压浓缩至近干。用10 mL硫酸水溶液（4.9)将残渣转移至50 mL塑料离心管中,加人20 mL乙酸乙酯，涡旋1 min，以 4000 r/min离心5min。乙酸乙酯转移至另一50 mL塑料离心管中,再加人20 mL乙酸乙酯，重复上述操作，合并乙酸乙酯提取液。加入10mL磷酸盐缓冲溶液（4.10），涡旋，以4000r/min离心5min，分取磷酸盐缓冲盐溶液，乙酸乙酯层中再加人10 mL磷酸盐缓冲溶液提取一次，合并磷酸盐缓冲溶液。滴加 50%硫酸溶液调节溶液 pH为2.5±0.2，加人20 mL乙酸乙酯，涡旋1min，以 4000 r/min离心5 min。将上层乙酸乙酯转移至浓缩瓶中，磷酸盐缓冲盐溶液层中再加人20 mL乙酸乙酯提取一次，合并乙酸乙酯提取液在 45℃以下水