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《生物学基础实验3》课程教学大纲 一、实验类别：学科基础实验 课程学分：1.5 二、实验总学时：24 三、应开实验个数：9 必开实验个数：9 选开实验个数：0 四、适用专业：园艺 五、实验成绩评定方法：根据实验报告评定实验成绩。 六、实验成绩占课程总成绩比例：100% 七、实验教材或自编指导书：自编 八、实验项目： 实验编号 实验项目名称 实验类型 实验学时 要求 实验一 植物根尖细胞的有丝分裂 验证性 2 必开 实验二 花粉母细胞减数分裂 验证性 2 必开 实验三 植物总DNA的快速提取和纯化 设计性 4 必开 实验四 小规模制备质粒DNA 综合性 4 必开 实验五 DNA限制性内切酶酶切 验证性 2 必开 实验六 重组DNA的转化 验证性 2 必开 实验七 转化子的快速鉴定 验证性 2 必开 实验八 基因的PCR扩增技术 验证性 2 必开 实验九 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳 综合性 4 必开 实验一 植物根尖细胞的有丝分裂 学时：2 （一）实验类型：验证性 （二）实验目的：观察有丝分裂各时期的特征和染色体行为，学习压片法技术。 （三）实验内容： 1．材料和方法：蚕豆、碗豆根尖。改良苯酚品红压片法。 2．作业：完成实验报告、绘图。 （四）要 求：必开 （五）每组人数：1 （六）主要仪器设备及配套数：双目生物显微镜40台，水浴锅1台，电子天平2台。 （七）所属实验室：植物科学实验室 实验二 花粉母细胞减数分裂 学时：2 （一）实验类型：验证性 （二）实验目的：学习涂抹制片方法，观察减数分裂各时期的主要特征。 （三）实验内容：玉米雄花穗花药改良苯酚品红涂片法。 （四）要 求：必开 （五）每组人数：1 （六）主要仪器设备及配套数：双目生物显微镜40台，电子天平2台。 （七）所属实验室：植物科学实验室 实验三 植物总DNA的快速提取和纯化 学时：4 （一）实验类型：设计性 （二）实验目的：掌握植物总DNA提取的原理和方法，可用于PCR、RAPD遗传分析等。 （三）实验内容：植物叶片等组织DNA的提取及纯化样品、电泳鉴定。 （四）要 求：必开 （五）每组人数：2 （六）主要仪器设备及配套数： 液氮罐、高速冷冻离心机、电泳仪、电泳槽、电子天平、微波炉、紫外透射仪各1台，200μl、1000μl、5000μl移液枪各7套。 （七）所属实验室：植物科学实验室 实验四 小规模制备质粒DNA 学时：4 （一）实验类型：综合性 （二）实验目的： 学习碱变性法小规模制备质粒DNA的技术，获得纯化的质粒DNA用于酶切。 （三）实验内容： 掌握碱变性法提取质粒DNA的原理和技术，同时学会质粒DNA提纯的方法，熟悉基因工程载体的特性。 （四）要 求：必开 （五）每组人数：1 （六）主要仪器设备及配套数： 高速离心机、恒温水浴、恒温摇床、高压灭菌锅、培养箱、DNA水平电泳槽、常压电泳仪、紫外检测仪、旋涡混合器各1台，200μl、1000μl、5000μl移液枪各7套。 （七）所属实验室：中心实验室 实验五 DNA限制性内切酶酶切 学时：2 （一）实验类型：验证性 （二）实验目的：学习限制性内切酶特异酶切质粒DNA产生粘性末端用于基因拼接的技术。 （三）实验内容： 掌握质粒载体DNA限制性核酸内切酶酶切的原理和技术，熟悉重组DNA分子的构建过程。 （四）要 求：必开 （五）每组人数：2 （六）主要仪器设备及配套数： 恒温水浴、DNA水平电泳槽、常压电泳仪、紫外检测仪各1台，200μl、1000μl、5000μl移液枪各7套。 （七）所属实验室：中心实验室 实验六 重组DNA的转化 学时：2 （一）实验类型：验证性 （二）实验目的：掌握体外重组的DNA引入受体细胞（大肠杆菌）的转化技术。 （三）实验内容：掌握体外DNA重组的技术，熟悉大肠杆菌受体菌的制备及转化的方法。 （四）要 求：必开 （五）每组人数：2 （六）主要仪器设备及配套数：恒温水浴、恒温摇床、高压灭菌锅、培养箱各1台，200μl、1000μl、5000μl移液枪各7套。 （七）所属实验室：中心实验室 实验七 转化子的快速鉴定 学时：2 （一）实验类型：验证性 （二）实验目的：掌握快速细胞破碎法鉴定重组DNA大小的技术。 （三）实验内容： 掌握快速鉴定重组DNA分子的技术，即快速细胞破碎法，率先筛选出所构建的重组DNA克隆。 （四）要 求：必开 （五）每组人数：2 （六）主要仪器设备及配套数： 高速离心机、恒温水浴、培养箱、DNA水平电泳槽、常压电泳仪、紫外检测仪、旋涡混合器各1台，200μl、1000μl、5000μl移液枪各7套。 （七）所属