NY_T 1756-2012饲料中孔雀石绿的测定.pdf

ICS 65.120B 46NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1756-2012代替NY/T 1756—2009饲料中孔雀石绿的测定Determination of malachite green in feeds2012-12-24 发布2013-03-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 1756—2012前言本标准按照GB/T1.1给出的规则起草。-本标准代替NY/T1756--2009《饲料中孔雀石绿的测定》。本标准与NY/T1756-2009的主要差异如下：-在适用范围中增加了“植物性饲料原料”和“精料补充料”；一液相色谱一串联质谱部分增加了进样前离心步骤；标准对6.2.12溶液浓度做了详细说明。本标准由农业部畜牧业司提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)归口。本标准起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所[国家饲料质量监督检验中心(北京)、浙江省饲料监察所。本标准主要起草人：李兰、索德成、贾铮、应永飞、杨曙明、朱聪英、赵根龙、魏书林、肖志明、杜洪鸽、孙志文、符金华。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：-NY/T1756—2009。-I NY/T 1756--2012饲料中孔雀石绿的测定1范围本标准规定了用液相色谱仪和液相色谱一串联质谱仪测定饲料中的孔雀石绿及其伺系物无色孔雀石绿含量的方法。本标准分为高效液相色谱法和高效液相色谱·串联质谱法，高效液相色谱一串联质谱法为确证法。本标准高效液相色谱法适用于鱼粉、配含饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、精料补充料中孔雀石绿和无色孔雀石绿含量的测定；高效液相色谱一串联质谱法适用于鱼粉、植物性饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、精料补充料中孔雀石绿和无色孔雀石绿含量的测定。液相色谱法测定孔雀石绿和无色孔雀石绿的定量限均为10ug/kg；液相色谱一串联质谱法测定孔雀石绿和无色孔雀石绿的定量限均为1.0ug/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3采样按GB/T14699.1的规定执行。4试样的制备选取有代表性饲料样品，按GB/T20195制备样品，过0.425mm（40目）孔筛。5液相色谱法5.1原理以乙腈一乙酸钠缓冲溶液提取样品中的孔雀石绿和无色孔雀石绿，提取液经过二氯甲烷液液萃取再经固相萃取柱净化，用接有二氧化铅柱的氰基柱进行高效液相色谱分离，紫外可见光检测器检测，列标法定量。-5.2 试剂除非另有规定，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T6682规定的一级用水。15.2.1乙腈：色谱纯。5.2.2二氯甲烷。5.2.3盐酸羟胺溶液：称取12.5g盐酸羟胺溶于50mL水中。5.2.4盐酸羟胺甲醇溶液：取1mL盐酸羟胺溶液(5.2.3)加甲醇定容至100mL。5.2.5乙酸钠缓冲溶液：称取4.95g无水乙酸钠和0.95g对甲苯磺酸于900mL水中，用冰乙酸调节pH4.5，用水定容至1000mL。mol/L对甲苯磺酸溶液：称取17.2g对甲苯磺酸，加水溶解并定容至100mL。1 NY/T 1756—20125.2.7中性氧化铝，粒度为0.071nm~0.1501nm，层析用。5.2.8乙腈--乙酸钠缓冲溶液：乙腈+乙酸钠缓冲溶液（5.2.5)=60+40。5.2.9氯化钠溶液：称取25g氯化钠，加水溶解并定容至500mL。5.2.10孔雀石绿标准贮备溶液：精确称取孔雀石绿标准品（纯度≥95%)0.1000g，用乙睛（5.2.1)溶解并定容至100mL。该溶液中孔雀石绿的浓度为1mg/mL，于一18℃保存可使用3个月。5.2.11无色孔雀石绿标准贮备溶液：精确称取无色孔雀石绿（纯度≥95%)0.1000g，用乙腈（5.2.1)溶解并定容至100mL。该溶液中无色孔雀石绿浓度为1mg/mL，于一18℃保存可使用3个月。5.2.12孔雀石绿和无色孔雀石绿混合中间液：精确移取孔雀石绿标准贮备溶液（5.2.10)和无色孔雀石绿标准贮备溶液（5.2.11)各5mlL，置于50mL棕色容量瓶中，用乙睛定容至刻度。该溶液中孔雀石绿和无色孔雀石绿均为101g/ml，于2℃～8℃保存可使用1个月。5.2.13孔雀石绿和无色孔雀石绿标准.I作液：精确移取孔雀石绿和无色孔雀石绿混合中间液（5.2.12)各1ml，置于100mL棕色容量瓶中，用乙腈一乙酸钠缓冲溶液（5.2.8)定容至刻度。该溶液中孔雀石绿和无色孔雀石绿均为100ng/ml，现用现配。5.3仪器与设备5.3.1高效液相色谱仪：配