SN_T 4532.3-2017商品化试剂盒检测方法 β-内酰胺类 方法三.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4532.3—2017商品化试剂盒检测方法方法三B-内酰胺类Commercial kit test methodBeta-lactamsTest method II2017-07-21发布2018-03-01实施中华人民共和国发布同国家质量监督检验检疫总局 SN/T4532.3—2017前 言β-内酰胺类》的第3部分，本部分为SN/T4532《商品化试剂盒检测方法本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分主要起草单位：中华人民共和国吉林出人境检验检疫局、中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、北京勤邦生物技术有限公司。本部分主要起草人：刘金华、聂丹丹、张勋、吴连鹏、罗雁非、郑晶、马文晨、孙舒、曲辉、彭勃、牟峻、邹明强。1 SN/T4532.3—2017商品化试剂盒检测方法β-内酰胺类方法三1范围SN/T4532的本部分规定了牛奶样品中β-内酰胺类药物的胶体金免疫层析检测方法。本部分适用于采用胶体金免疫层析试纸条对牛奶中β-内酰胺类药物的定性检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T2775商品化食品检测试剂盒评价方法3原理应用胶体金竞争抑制免疫层析法的原理，样品中的β-内酰胺类药物与检测线上的β-内酰胺类抗原共同竞争胶体金标记的特异性单克隆抗体，通过检测线与控制线颜色深浅比较，对样品中待测物的含量定性判定。4试剂与材料4.1β-内胺类快速检测试剂盒参考SN/T2775由国家认监委商品化食品检测试剂盒评价专家委员会进行了评价，评价结果参见附录A。4.2商品化试纸条、微孔反应试剂在2℃～8℃、干燥、避光条件下保存，产品有效期不得少于12个月。4.3试剂盒组成如下：a）β-内酰胺类检测试纸条；b）微孔试剂（主要成分为肢体金标记的β-内酰胺类抗体)。5仪器设备移液器：200μL。6样品制备检测前样品需充分混匀。1）北京勤邦生物技术有限公司产品，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他产品能有相同的效果，则可使用这些等效的产品。1 SN/T 4532.3—20177分析步骤7.1将所需数目的试纸条和待检牛奶样品恢复至室温，并在60min内尽快使用。7.2用微量移液器吸取200μL牛奶样本于微孔中，使其充分与微孔中试剂混匀后，开始计时。7.3室温（20℃～25℃）孵育5min后，将标记好的试纸条插人微孔中-印有“MAX”线端朝下，使之充分浸人溶液中。7.4再次室温（20℃～25℃）孵育5min后，取出试纸条并根据示意图判断结果，8结果判定通过对比控制线和检测线的颜色深浅来进行结果判定目视结果判定依据：a）无效：未出现控制线（C线），表示操作不正确或试纸条已失效。阴性：控制线（C线）显色，检测线（T线）显色，无论颜色深浅，均表示牛奶样本中β-内酰胺类b)抗生素浓度低于检测限阳性：控制线（C线）显色，检测线（T线）不显色，表示牛奶样品中β-内酰胺类抗生素浓度等于c)或高于检测限。9方法性能指标9.1检出限kg；阿莫西林：5μg/kg；苯甲异嗯唑青霉素：8μg/kg；邻氯青青霉素G：4μg/kg；氨芊青霉素：4μg/l霉素：8μg/kg；双氯青霉素：8μg/kg;萘夫西林30μg/kg;头孢哌酮：50μg/kg；头孢曲松：100μg/kg；头孢洛宁：10μg/kg；头孢喹：20μg/kg；头孢噻：100μg/kg9.2特异性氯霉素、强力霉素、沙拉沙星、螺旋检测浓度40 μg/kg的金霉素、盐酸土霉素、四环素、达氟沙星、星、头孢唑啉、头孢氨苄、头孢匹林钠，头孢呋均无交叉反应。霉素、林可霉素盐酸盐、双氟沙星2 SN/T4532.3—2017附录A（资料性附录）牛奶中β内酰胺类快速检测试纸条评价结果？A.1灵敏度灵敏度见表A.1。表A.1灵敏度药物名称检测限范围/（μg/kg）验证浓度水平/（μg/kg）2~4青霉素G(penicillinG)44氨苄青霉素（Ampicillin）3~44~55阿莫西林（Amoxicillin)8苯甲异嗯唑青霉素（Oxacillin）6~86~88邻氯青霉素（Cloxacillin）6~88双氯青霉素（Dicloxacillin）蔡夫西林（Nafcillin）20~303050头孢哌酮（Cefoperazone)40孢曲松（Ceftriaxone)1010头孢洛宁（Cefalonium）头孢喹（Cefquinome）2020100100头孢噻呋（Ceftiofur）A.2特异性检测浓度40μg/kg