SN_T 0172-2010进出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0172—2010代替SN/T0172—1992进出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法Determination of Staphylococcus aureusin foods for import and export2010-12-01实施2010-05-27发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局数码防伙 SN/T0172—2010前 言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准代替SN0172—1992《出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法》。本标准与SN0172—1992相比，主要技术变化如下：将原标准名称《出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法》修订为《进出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法》。将原标准的范围修订为：“本标准适用于进出口食品中金黄色葡萄球菌检验”；在仪器和设备中增加了pH计、天平、均质器并在检样制备中增加了拍击式均质器的拍击速度及时间。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国山东出人境检验检疫局。本标准主要起草人：赵宏、高旗利、雷质文、张海滨、张宏伟、魏亚东、赵良娟、侯丽萍、张曼、李正义、唐静、张健、马维兴，本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN0172—1992。 SN/T0172—2010进出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法1范围本标准规定了进出口食品中金黄色葡萄球菌的检验方法本标准适用于进出口食品中金黄色葡萄球菌的检验。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T1538.1培养基制备指南第1部分：实验室培养基制备质量保证通则SN/T1538.2培养基制备指南第2部分：培养基性能测试实用指南3检验方法3.1培养基和试剂普通肉汤培养基：见附录A第A.1章。.2胰蛋白陈大豆肉汤：见附录A第A.2章。Baird-Parker培养基（BP)：见附录A第A.3章。3.1.3甲苯胺蓝-DNA琼脂：见附录A第A.4章。.5生理盐水：见附录A第A.5章。3.1.6凝固酶试验兔血浆：见附录A第A.6章。3.2设备与材料3.2.1供常规平板计数用的基本设备与材料。3.2.2L形玻璃棒。3.2.3pH计。3.2.4天平：精确至0.1g。3.2.5均质器或拍击式均质器。5无菌均质杯或均质袋（NascoWHIRL-PAK24OZ./710mL或相当者）。检样制备3.3.1固体或半固体食品以无菌操作称取25g样品，放人装有225mL灭菌生理盐水的灭菌均质杯（无菌均质袋）内，于8000r/min均质1min～2min或用拍打式均质器以每秒6次～9次挤压、拍击1min，制成1：10样品匀液。3.3.2液体食品用灭菌吸管吸取25mL样品，放人装有225mL灭菌生理盐水的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠），经充分振摇制成1：10样品匀液。3.3.3供计数检验时，可按十进位递增稀释法将样品匀液再进行适当稀释。1 SN/T0172—20103.4操作步骤3.4.1最可能数（MPN）测定法适用于检测认为带有大量竞争菌的食品及其原料和含少量金黄色葡萄球菌的食品。选3个连续稀释度，从每个稀释度分别取1mL稀释样品液，接种3管含10%氯化钠胰蛋白陈大豆肉汤。样品的最高稀释度应达到能获得阴性终点，置36℃土1℃培养48h。用3mm接种环，从有细菌生长的各管中移取1环，划线接种于表面干燥的BP琼脂平板，置36℃土1℃培养45h~48h。从有细菌生长的每一平板上至少挑取5个可疑金黄色葡萄球菌菌落（参见附录B），移种到普C培养20h~24h。通肉汤培养基中，置36℃土取肉汤培养物0.3mL同0.5mlL凝固酶试验免血浆于8mm×100mm试管内充分混合，置36℃士1℃培养，定时观察是否有凝块形成，至少观察6h，以内容物完全凝固，使试管倒置或倾斜时不流动者为阳性。试验中需同时做已知阳性和阴性对照。对典型或可疑结果进行革兰氏染色，镜检和其他辅助试验[如：耐热核酸酶试验（参见附录C加以证实3.4.2平板表面计数法适用于检查金黄色萄球菌数不小于10g或10mL的食品。选3个连续稀释度，从每个稀释度分别取1mL稀释样液，接种至3个表面干燥的BP琼脂平板上（如：0.4mL一0.3mL一.3mL)以L形玻璃棒将接种物涂布于琼脂表面，避免涂到平板边缘，将平板正置直至接种物被培养基吸收，将平板翻转，36℃±1℃培养45h～48h的平板进行计数。如果有数种菌落皆类似金黄色葡萄球菌，则分挑选有20个～200菌不落别计算和记录每一类型的菌落最低稀释度的平板的菌落数教业小于20时，仍可选用。如平板上的菌黄色落