SN_T 4521-2016出口番茄酱中链霉素和双氢链霉素的测定 液相色谱-质谱/质谱法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4521—2016出口番茄酱中链霉素和双氢链霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法Determination of streptomycin and dihydrostreptomycin residues intomato paste for export-LC-MS/MS method2017-02-01实施2016-06-28 发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局59w315.刮涂层查真伪 SN/T 4521—2016前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国新疆出人境检验检疫局、中华人民共和国浙江出人境检验检疫局。本标准主要起草人：巩志国、季新诚、苏敏、李世雨、谢文、王静静、齐冬琴、叶青 SN/T 4521--2016出口番茄酱中链霉素和双氢链霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法1范围本标准规定了番茄酱中链霉素和双氢链霉素的测定液相色谱-质谱/质谱法。本标准适用于番茄酱中链霉素和双氢链霉素残留量的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682　分析实验室用水规格和实验方法3方法提要采用磷酸盐缓冲溶液提取链霉素和双氢链霉素，经硅藻土吸附和串联双柱固相萃取净化相结合的处理方法净化，用液相色谱-质谱/质谱仪进行测定和确证，外标法定量。4试剂和材料除特殊注明外，所有试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的-级水。4.1日甲醇和乙腈：色谱级。4.2甲酸：纯度98%，色谱级。4.3磷酸：优级纯。4.4　乙二胺四乙酸二钠。4.5盐酸：优级纯。4.6 磷酸二氢钾。4.7磷酸盐缓冲溶液（pH=4.8）：称取 1.36 g 的磷酸二氢钾（KHzPO4）溶解到 950 mL水中，用1 mol/L的盐酸（HCI)调节 pH 为 4.8,然后加人 0.15 g 的乙二胺四乙酸二钠，充分溶解，最后用水去定容到 1 000 ml4.83%的甲酸甲醇溶液:取 3.0 mL的甲酸，用甲醇定容至100 mL。4.91 mol/L的盐酸:取 8.5 ml的盐酸,用水定容至 100 mL。4.10乙腈-水（50十50，体积比，含 0.1%甲酸）：量取 50 mL水和 50 mL乙睛混匀，并加人0.1 mL甲酸。4.110.15%的甲酸溶液：量取1.5 mL甲酸，用水定容至1L。4.1250%甲醇水溶液：量取50mL水和50 mlL甲醇混匀。4.13标准品：链霉素（Streptomycin）（CAS号57-92-1）和双氢链霉素（Dihydrostreptomycin）（CAS号128-46-1);纯度:98%。4.14标准储备液：称取适量4.13标准品（精确至0.1mg），用0.3%的甲酸水配制成500mg/L的储备1 SN/T 4521-2016液，于0℃～4℃冰箱中避光保存。4.15标准工作液：根据需要用空白样品溶液将标准储备液稀释成：0.05mg/1.0.10mg/L，0.20 mg/L,0.40 mg/L，0.80 mg/L的标准系列工作溶液。现用现配。4.16固相萃取柱：反相固相萃取柱 1:Strata-X(500 mg/6 mL)或 HLB(200 mg/6 mL)和弱阳离子交换固相萃取 2:Strata-X-CW(200 mg/6 mL)或 WCX(150 mg/6 mL)。4.17再生纤维素微孔滤膜：0.2 μm。4.18硅藻土(40 μm~60 μm)。仪器和设备55.1液相色谱-质谱/质谱仪，配有电喷雾离子源(ESI)。5.2 pH计。5.3固相萃取装置（SPE）。5.4分析天平：感量为0.1mg和0.01g。5.5振荡器。5.6超声仪。5.7 离心机。5.8涡旋仪。5.9氮吹仪。6 试样制备和保存从所取全部样品中取出有代表性样品约500g，混合均匀，均分成两份，分别装人洁净容器作为试样,密封,并标明标记。将试样于18℃冷冻保存。在抽样和制样的操作中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。 测定步骤7.1#样品处理7.1.1提取称取5.00g样品，加人提取液磷酸盐缓冲溶液（4.7）于样品中，定容至20mL。涡旋仪上涡旋1 min，超声 30 min，以8000 r/min离心10 min，离心后的上清液待后续净化。7.1.2初净化取10.0 mL7.1.1中离心后的上清液于15 mL的离心管中，同时往离心管中加人1.0g的硅藻土，充分涡旋1min，超声5min，以6000 r/m