NY_T 1248.8-2016玉米抗病虫性鉴定技术规范 第8部分：镰孢穗腐病.pdf

ICS 65.020B 16NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 1248.8—2016玉米抗病虫性鉴定技术规范第8部分：镰孢穗腐病Technical specification on evaluation of maize resistance to pests-Part 8:Fusarium and gibberella ear rot2016-10-26发布2017-04-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T1248.8—2016前言NY/T1248《玉米抗病虫性鉴定技术规范》拟分为13个部分：第1部分：大斑病；第2部分：小斑病；第3部分：丝黑穗病；第4部分：矮花叶病；-第5部分：玉米；第6部分：腐霉茎腐病；一第7部分：镰孢茎腐病；第8部分：镰孢穗腐病；第9部分：纹枯病；第10部分：弯孢叶斑病；-第11部分：灰斑病；第12部分：瘤黑粉病；第13部分：粗缩病。本部分为NY/T1248的第8部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本部分由农业部种子管理局提出并归口。本部分起草单位：中国农业科学院作物科学研究所、全国农业技术推广服务中心、河北省农林科学院植物保护研究所、四川省农业科学院植物保护研究所、吉林省农业科学院植物保护研究所。本部分主要起草人：王晓鸣、孙世贤、石洁、李晓、普齐鸣I NY/T1248.8—2016玉米抗病虫性鉴定技术规范第8部分：镰孢穗腐病1范围本部分规定了玉米抗镰孢穗腐病鉴定技术方法和抗性评价标准。本部分适用于裁培玉米（ZeamaysI.）自交系、杂交种、群体、开放授粉品种以及野生玉米和玉米近缘种对镰孢穗腐病抗性的田间鉴定和评价。2术语和定义下列术语和定义适用于本文件。2. 1镰孢穗腐病fusariumandgibberellaearrot由拟轮枝镰孢（FusariumVerticillioides）、禾谷镰孢（Fusriumgraminearum）等镰孢菌所引起的以玉米雌穗上籽粒腐烂为特征的病害。该病害表现为玉米雌穗因病原菌侵染而发生部分籽粒腐烂或全穗籽粒及穗轴腐烂或部分籽粒呈现紫红色条纹，2.2花丝通道接种silkchannelinoculation采用镰孢菌分生孢子悬浮液经玉米花丝通道注射而进行玉米抗镰孢穗腐病鉴定的技术。2. 3籽粒伤口接种kernelinoculation采用粗大金属针蘸取镰孢菌分生孢子悬浮液后刺穿玉米雌穗苞叶至籽粒的接种技术或采用长有镰孢菌菌丝体的牙签刺穿苞叶并保留在籽粒上的接种技术。3镰孢菌接种体制备3.1病原菌分离以常规组织分离法从发生穗腐病的玉米籽粒中分离致病镰孢菌。病原菌经形态学鉴定确认为镰孢菌（Fusαrium spp.）（参见附录A）后，进行单孢纯化培养和致病性测定。3.2致病种鉴定由于多种镰孢菌可以引起玉米穗腐病，因此对用于抗性鉴定接种的病原菌应进行种的鉴定。鉴定采用形态学方法并结合分子鉴定技术对病原菌进行特异性检测；若病原菌为不谷镰孢复合种，还应对病原菌的翻译延伸因子（translationelongationfactor1alpha.TEF-1α）等基因进行序列测定通过基因序列比对确定病原菌的种（参见附录A）。通过玉米幼苗根系接种.明确病原菌的致病性。3.3病原菌繁殖在接种前需要进行病原菌的繁殖。3.3.1拟轮枝镰孢分生孢子的产生将病原菌接人液体培养基中，在25℃、自然光下静置培养10d～15d。以双层纱布过滤培养物并获得分生孢子悬浮液.用无菌水将分生孢子悬浮液浓度调至2×10°孢子/ml.即可用于接种1 NY/T1248.8-20163.3.2禾谷镰孢分生孢子的产生将病原菌接入分生孢子诱导培养基中，在25℃、自然光条件下振荡（120rpm)培养7d。以双层纱布过滤培养物并获得分生孢子悬浮液，用无菌水将分生孢子悬浮液浓度调至2×10°孢子/mL.即可用于接种。分生孢子悬浮液可在2℃～4℃下保存3周～4周。3.3.3拟轮枝镰孢/禾谷镰孢带菌牙签的培养在马铃薯葡萄糖琼脂平板培养基或倒有培养基的100ml.容量烧杯中接种拟轮枝镰孢或不谷镰孢，培养7d后.将无菌牙签插入长满镰孢菌的培养基中.25℃下黑暗培养7d～10d.待菌丝生长至牙签1/3处后即可用于接种。4抗病性鉴定圃4.1鉴定圃设置鉴定圃应具备良好的自然发病环境，能够进行自主灌溉。4.2鉴定设计鉴定材料随机排列或顺序排列。在进行选育品种抗病性鉴定时，每30行鉴定材料设1组已知抗病和感病对照材料（参见附录B）。在进行种质资源抗病性鉴定时，每50行鉴定材料设1组已知抗病和感病对照材料。4.3种植要求鉴定材料播种时间与生产播种时间相同。鉴定小区行长5.00m，行距0.60m或0.65m条播或穴播，确保每行留苗25株～30株，低于25株时视为该品种/材料鉴定无效。鉴定种质资源时，每份鉴定材料种植