SNT 2098-2008食品和化妆品中的菌落计数检测方法 螺旋平板法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T品和化妆品中的菌落计数检测方法螺旋平板法Determination of aerobic bacterial count in foods and cosmetics-Spiral plate method2008-07-17 发布2009-02-01实施中华人民共和国涂抗 10915湾查发布国家质量监督检验检疫总局数码防伪 SN/T 2098—2008前言本标准的附录 A为规范性附录,附录 B为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国福建出人境检验检疫局。本标准主要起草人：陈彬、黄晓蓉、郑晶、吴谦、汤敏英、张体银、林杰。本标准系首次发布的出人境检验检疫标准。 SN/T 2098--2008食品和化妆品中的菌落计数检测方法螺旋平板法1范围本标准规定了食品和化妆品中菌落计数的检测方法。本标准适用于各类食品和化妆品的菌落计数。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T7918.1＇化妆品微生物标准检验方法总则…SN0168出口食品平板菌落计数SN/T1538.1一2005培养基制备指南第-部分：实验室培养基制备质量保证通则3原理螺旋接种菌落计数是依据阿基米德螺旋原理，使样品以对数规律螺旋线形式接种在平板上。样品接种后，菌落即分布在螺旋轨迹上，随半径的增加分布得越来越稀。采用特殊的计数栅格，自平板外周向中央对平皿上的菌落进行计数，即可得到样品中微生物的数量4设备和材料4. 1螺旋接种仪。4.2菌落计数仪。4.3均质器。4.4恒温培养箱:36℃±1℃,30℃4.5样品杯:容量5mL。4.6电子天平：精确至0.1g。4.7灭菌吸管:1 mL、10 mL4.8²灭菌平Ⅲ:100 mm、150 mm。4.9稀释瓶：广口瓶或锥形瓶，容量为250mL和500mL。5:培养基和试剂5.1稀释液：磷酸盐缓冲稀释液见第 A.1章。5.21 mol/L氢氧化钠(NaOH):称取 40 g NaOH溶于 1 000 mL蒸馏水中。5.31 mol/L盐酸（HCl):移取浓盐酸 90 mL用蒸馏水稀释至 1 000 mL。5.4平板计数琼脂：见第A.2章。5.5卵磷脂吐温-80 营养琼脂：见第A.3章。5.65.25%次氯酸钠。5.7灭菌液体石蜡。 SN/T 2098—20085.8灭菌吐温-80。6操作步骤6.1平板制备按SN/T1538.12005中4.3的规定，制备和储存用于食品检测的平板计数琼脂和用于化妆品检测的卵磷脂吐温-80 营养琼脂。6.2样品制备6.2.1按SN0168的方法进行食品样品制备。制备1：10的样品匀液后，无菌操作调节该样品匀液的pH 为 6.6～7.2,酸性样液用1 mol/L氢氧化钠,碱性样液用 1 mol/L盐酸调节,或根据产品标准规定的酸碱溶液来调节 pH 值。6.2.2化妆品样品按GB/T7918.1方法进行样品制备。6.2.3根据食品卫生标准要求或对样品污染情况的估计，参照螺旋接种仪接种模式的计数范围选择1个～2个适宜稀释度检验。6.2.4如果样品稀释液中的微粒会阻塞接种针，应先过滤除去微粒或静置5 min。6.3＇接种平板6.3.1平板使用前按SN/T1538.1一2005中4.4.4的规定或用适宜的方法对琼脂表面进行干燥，使培养基表面的水滴消失，注意不要过度干燥，并做好标记。6.3.2在螺旋接种仪上选择平板规格，100mm”或150mm”平板，并选择接种模式。6.3.3取制备好的适宜稀释度的样品稀释液，以选定的模式接种于平板计数琼脂平板或卵磷脂吐温-80营养琼脂平板，每个稀释度接种两块平板。6.3.4接种每一个样品前后均按仪器设定程序对螺旋接种仪进行清洗消毒。6.3.5按相同接种模式接种稀释液作为空白对照。6.4　培养将接种后平板翻转，置于36℃±1℃的恒温培养箱内培养48h士2h（水产品30℃±1℃培养72h土3h），如有产品标准等特殊要求，则按相应的标准或要求进行。6.5菌落计数和记录6.5.1到培养时间后应立即计数，如果不能立即计数，应将平板存放于0℃～4℃冰箱，但不超过24 h.6.5.2将平板放在菌落计数仪载物台上，选择适当的背景和光源，选定接种模式和稀释度，按照菌落计数仪的操作规程计数每个平板菌落数，并记录。6.6菌落总数的计算和记录6.6.1平板上菌落数符合菌落计数仪规定计数范围的为合适范围。（如：第B.3章所列的计数范围。）6.6.2如果两个稀释度的四个