NY_T 2010-2011柑桔类水果及制品中总黄酮含量的测定.pdf

ICS 67.080.10B 31NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 2010—2011柑橘类水果及制品中总黄酮含量的测定Determination of total flavonoids in citrus fruits and derived products2011-09-01 发布2011-12-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T 2010—2011前言本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出本标准由全国果品标准化技术委员会(SAC/TC 501)归口。本标准起草单位：中国农业科学院柑橘研究所、农业部柑橘及苗木质量监督检验测试中心。本标准主要起草人：焦必宁、赵其阳、王成秋、苏学素。I NY/T 2010—2011柑橘类水果及制品中总黄酮含量的测定1范围本标准规定了柑橘类水果及制品中总黄酮含量的比色检测法。本标准适用于柑橘类水果及制品中总黄酮含量的测定。本标准总黄酮的定量测定范围:0.8mg/L～100mg/L。本标准总黄酮的定量限:0.8mg/kg。本标准总黄酮的检出限：0.3mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试料中的黄烷酮类(橙皮苷、新橙皮苷等)与碱作用,开环生成 2,6-二羟基-4-环氧基苯丙酮和对甲氧基苯甲醛;在二甘醇环境中遇碱缩合生成黄色橙皮素查耳酮,其生成量相当于橙皮苷的量；在波长420 nm处比色测定吸光度，扣除本底后，与标准曲线比较定量4试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T 6682规定的三级水。4.1氢氧化钠溶液（4.0g/L)：称取4.0g氢氧化钠于烧杯中，用水溶解，转人1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。4.2氢氧化钠溶液（160g/L)：称取16.0g氢氧化钠于烧杯中，用水溶解，转入100mL容量瓶中，用水定容至刻度。4.3柠檬酸溶液(200g/L)：称取200g柠檬酸于烧杯中，用水溶解，转人1000mL容量瓶中，用水定容至刻度。4.4一缩二乙醇(二甘醇)溶液(C H1oOs,9十1):量取 900mL二甘醇,加人100mL水,摇匀。4.5试剂空白溶液：量取 20mL氢氧化钠溶液（4.1)于50mL烧杯中，用柠檬酸溶液（4.3)调节pH至6.0,转人100 mL容量瓶中,用水定容。4.6橙皮苷标准品（C2gH34O15，CAS号520-26-3,纯度大于99.0%）。4.7橙皮苷标准溶液（200mg/L)：称取20.0mg橙皮苷，置于50mL烧杯中，加20mL氢氧化钠溶液（4.1),待其完全溶解后，用柠檬酸溶液（4.3)调节pH至6.0,转人100mL容量瓶中，用水定容。此标准溶液需现用现配。5仪器和设备5.1可见分光光度计。5.2分析天平：感量 0.0001g和0.01g。5.3组织捣碎机。1 NY/T 2010—20115.4酸度计：精度到0.1pH单位。5.5恒温水浴：温控士1℃。6分析步骤6.1试样制备6.1.1果实样品，取可食部分按四分法缩分后将其切碎，放入组织捣碎机中匀浆后取样。6.1.2果酱、果汁及饮料样品，充分混匀后直接取样。6.1.3罐头样品，按四分法进行缩分后，放入组织捣碎机中匀浆后取样。6.1.4果脯蜜饯类，按四分法进行缩分后,将其切碎充分混匀后取样。6.2提取称取两份平行试料（一般果皮5g,果肉、橘子罐头及果脯蜜饯类5g～10g，原汁、浓缩汁2g～5g，果汁饮料20g50g;精确到0.01g)于100mL烧杯中，加人10mL氢氧化钠溶液（4.1），用氢氧化钠溶液（4.2)调节pH至13.0;摇匀，静置 30min后，再用柠檬酸溶液调节 pH至6.0,转移到100mL容量瓶中，定容;过滤，收集滤液，备用。6.3标准工作曲线准确吸取 0mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4. 00mL和 5.00 mL 橙皮苷标准溶液（4.7)于六支10mL具塞试管中，用试剂空白液（4.5)定容至5.00mL,摇匀;再依次准确加人5mL二甘醇溶液（4.4)与0.1mL氢氧化钠溶液（4.2）,摇匀,配制成0mg/L、20.0mg/L、40.0 mg/L、60.0mg/L、80.0 mg/L和100 mg/L系列标准溶液。将各试管置于 40℃水浴中保温10 min;取出，在冷水浴中冷却 5min。以零标准溶液调零，在波长420nm处测定各标准溶液的吸光度；绘制标准曲线或计算线性回归方程。6.4　测定吸取1.00mL～5.00mL试液(6.2)于10mL具塞试管中,用试剂空白溶液定容至.5.00