病毒及病毒类疾病的实验室诊断—病毒的培养技术（动物微生物技术课件）.pptx

动物微生物应用技术;任务二：病毒的培养技术;一、病毒增殖;病毒的增殖过程;吸附——病毒与细胞接触，依赖病毒吸附点，通过包膜表面或表面的配体蛋白与相应的受体结合； 穿入——融合（有包膜）、吞饮（无包膜）、直接穿入； 脱壳——宿主细胞溶酶体作用下，衣壳破裂、释放核酸； 生物合成——随核酸类型而异(复制、转录、翻译)； 装配——子代病毒核酸和结构蛋白组装成病毒核衣壳。核内装配、核外装配； 释放——离开宿主细胞，出芽、挤破、细胞分裂。;脊椎动物 病毒繁殖;动物接种 病毒通过注射、口服等途径进入易感动物体内并大量繁殖，使动物产生特定反应。 要求：被接种的实验动物健康。血清中无相应的病毒抗体。 用途：病原学检查、传染病的诊断、抗血清制造及疫苗效力检验。 缺点：实验动物难于管理、成本高、个体差异大。;鸡胚培养法 病毒接种于鸡胚后，观察病毒的增值情况，可根据鸡胚的病变和病毒抗原检测等方法进行判断。 要求：鸡胚健康、不含特异性病毒抗体、SPF鸡胚。 接种途径：绒毛尿囊膜、羊膜腔、尿囊腔、卵黄囊等 用途：病毒的分离、鉴定、病毒复制、制备抗原和疫苗。;细胞培养法 在体外利用离体的活细胞进行病毒培养的方法。能导致细胞病变（变形）或者出现血细胞吸附和血凝现象。 细胞：原代细胞、二倍体细胞株、传代细胞。 用途：病毒的分离、增值，病毒抗原疫苗制备，中和试验、病毒空斑测定、克隆纯化等。 优点：离体活细胞不容易受机体免疫力影响，病毒易于生长；可人工选择多种敏感细胞供病毒生长，病毒产量高；易于观察病毒的生长特征；便于收集病毒做进一步检查。