QB_T 5299-2018葡萄酒中甘油稳定碳同位素比值（13C/12C）测定方法 液相色谱联用稳定同位素比值质谱法.pdf

ICS 67.160.10QB分类号：X62备案号：65911-2018中华人民共和国轻工行业标准QB/T5299—2018葡萄酒中甘油稳定碳同位素比值（13C/12C)测定方法液相色谱联用稳定同位素比值质谱法Determination of the 13c//2C isotope ratio of glycerol in wines—Method usingliquid chromatography coupled to isotope ratio mass spectrometry2018-10-22发布2019-04-01实施发布中华人民共和国工业和信息化部 QB/T5299-2018前 言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国食品发酵标准化中心归口。本标准起草单位：中国食品发酵工业研究院有限公司、北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心、新疆中信国安葡萄酒业有限公司、江南大学。本标准主要起草人：钟其顶、王道兵、韩深、毛健、赵玉玲、岳红卫。本标准为首次发布。 QB/T5299—2018葡萄酒中甘油稳定碳同位素比值（13℃/12c）测定方法液相色谱联用稳定同位素比值质谱法1范围本标准规定了应用液相色谱-稳定同位素比值质谱法测定甘油稳定碳同位素比值（13c/12c）的方法。本标准适用于葡萄酒中甘油稳定碳同位素比值（13c/12c）的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法3符号和缩略语下列符号和缩略语适用于本文件。13c/12C：稳定碳同位素比值，即稳定碳同位素13c与12C的原子丰度之比s13C：样品的稳定碳同位素比值相对于参考物质的稳定碳同位素比值的千分差VPDB：美国南卡罗来纳州白垩纪皮狄组层位中的拟箭石化石，是稳定碳同位素比值的国际基准物质（ViennaPee-DeeBelemnite）LC-IRMS：液相色谱联用稳定同位素比值质谱仪（LiquidChromatographycoupled toIsotopeRatioMass Spectrometry)4原理用LC-IRMS测定样品中甘油经分离纯化后转化成的二氧化碳中的稳定碳同位素比值，并通过公式计算得出甘油的稳定碳同位素比值，记作s13CvpDB。5试剂和材料除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682一2008规定的一级水。5.1参考物质可选择国际原子能机构或全国标准物质管理委员会认定/认可，或选择同类获得国际/国家认可的参考物质，根据实际工作需要选择其中一种或几种，参见附录A。5.2氢气：纯度不应小于99.999%。5.3二氧化碳工作标准气：纯度不应小于99.99%。5.4浓硫酸。5.5硫代硫酸钠：纯度不应小于99%。5.6磷酸：纯度不应小于99%。5.7甘油：纯度不应小于99%。 QB/T5299-20186仪器和设备6.1液相色谱-稳定同位素比值质谱仪。6.2溶剂过滤器。6.3分析天平。6.4水系滤膜：0.22μm。6.5移液枪：100μL。7分析步骤7.1样品处理用水将葡萄酒样品稀释至甘油含量0.3g/L0.4g/L，样品溶液用水系滤膜过滤（6.4）后保存待用，7.2工作标准溶液配制选择s13CvpDB值分布范围为-35%～-5%（定值方法参见附录B）的甘油（5.7）作为工作标准物质，称取0.02g甘油并用水稀释至甘油含量0.3g/L～0.4g/L，用水系滤膜过滤后保存待用。7.3试剂配制005mol/L硫酸溶液：移取27μL浓硫酸（5.4），用水定容至1000mL，混匀后用溶剂过滤器（6.2）过滤。5mol/L硫代硫酸钠溶液：称取39.5g硫代硫酸钠（5.5），用水溶解并定容至500mL，混匀后用溶剂过滤器过滤。mol/L磷酸溶液：称取49.0g磷酸（5.6），用水溶解并定容至500mL，混匀后用溶剂过滤器过滤。7.4参考色谱条件7.4.1色谱柱：H弱阳离子交换色谱柱（300mm×7.7mm×8um）或性能相当者。7.4.2流动相：0.0005mol/L硫酸溶液（7.3.1）。7.4.3流量：300μL/min。7.4.4色谱柱温度：60℃。7.5反应炉条件7.5.1氧化剂：0.25mol/L硫代硫酸钠溶液（7.3.2），流速50μL/min。7.5.2酸剂：0.5mol/L磷酸溶液（7.3.3），流速50μL/min。7.5.3反应炉温度：99.7℃。7.6测定7.6.1仪器准备LC-IRMS稳定