SN_T 1870-2016出口食品中食源性致病菌检测方法 实时荧光PCR法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T1870—2016替代SN/T1870—2007出口食品中食源性致病菌检测方法实时荧光PCR法Method for the detection of pathogens in food for export-Real-time PCR method2016-03-09发布2016-10-01实施中华人民共和国发布0国家质量监督检验检疫总局31OND涂层查真伪 SN/T1870—2016前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准参考美国FDA细菌学分析手册第二十九章阪崎克罗诺杆菌2012（Chapter29：Cronobacter2012ofFDABacteriologicalAnalyticalManual)，对原标准文本格式、某些文字表述和文本内容进行修订。本标准代替SN/T1870一2007《食品中致病菌检测方法实时荧光PCR法》本标准与SN/T1870—2007相比主要变化如下：增加了阪崎克罗诺杆菌的实时荧光PCR检测方法。增加了DNA浓度和纯度的测定。修改了实时PCR反应体系。删除了“测定低限”。防止交叉污染的措施改为按照SN/T1193的规定执行”并删除附录B。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国山东出人境检验检疫局、深圳太太基因工程有限公司。本标准主要起草人：曹际娟、贾俊涛、倪长鹏、郑秋月、徐君怡、肖性龙、张经纬。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T1870—2007。- SN/T1870—2016出口食品中食源性致病菌检测方法实时荧光PCR法1范围本标准规定了食品中沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、空肠弯曲菌、单核细胞增生李斯特氏菌、肠出血性大肠埃希氏菌O157：H7、霍乱弧菌、阪崎克罗诺杆菌、创伤弧菌和溶藻弧菌的实时荧光PCR检测方法。本标准适用于食品中沙门氏菌、志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、空肠弯曲菌、单核细胞增生李斯特氏菌、肠出血性大肠埃希氏菌O157:H7、霍乱弧菌、阪崎克罗诺杆菌、创伤弧菌和溶藻弧菌的快速检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验GB 4789.5食品安全国家标准食品微生物学检验志贺氏菌检验GB 4789.7食品安全国家标准食品微生物学检验副溶血性弧菌检验GB/T 4789.8食品卫生微生物学检验小肠结肠炎耶尔森氏菌检验GB 4789.9食品安全国家标准食品微生物学检验空肠弯曲菌检验GB4789.10食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验GB 4789.30食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验GB 4789.40食品安全国家标准食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB19489实验室生物安全通用要求GB/T27403一2008实验室质量控制规范食品分子生物学检测SN/T0973进出口肉、肉制品以及其他食品中肠出血性大肠杆菌O157：H7检测方法SN/T1022进出口食品中霍乱弧菌检验方法NMKLNo.156食品中致病性弧菌的检测和计数3术语、定义和缩略语下列术语、定义和缩略语适用于本文件。3.1术语和定义3.1.1实时荧光PCRrealtimePCR在PCR反应体系中加人荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控整个PCR扩增过程。1 SN/T1870—20163.1.2Ct 值cycle threshold每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。3.2缩略语Ct值：每个反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数（C：Cycle，t：threshold)dATP：脱氧腺苷三磷酸（deoxyadenosinetriphosphate）dCTP：脱氧胞苷三磷酸（deoxycytidinetriphosphate）dGTP：脱氧鸟苷三磷酸（deoxyguanosinetriphosphate)DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonuleicacid）dNTP：脱氧核苷酸三磷酸（(deoxyribonucleosidetriphosphate)dTTP：脱氧胸苷三磷酸（deoxythymidinetriphosphate）dUTP：脱氧尿苷三磷酸（deoxyuridinetriphosphate）FAM：6-羧基荧光素（6-carboxyfluorescePCR：聚合酶链式反应，简称PCR(per