NY_T 3030-2016棉花中水溶性总糖含量的测定 蒽酮比色法.pdf

ICS 65.020B 32NY中华人民共和国农业行业标准NY/T 3030—2016棉花中水溶性总糖含量的测定葱酮比色法Determination of total water-soluble sugars in cotton-anthrone colorimetry2016-12-23发布2017-04-01实施中华人民共和国农业部发布 NY/T3030—2016前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由农业部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：中国农业科学院棉花研究所、安徽中棉种业长江有限责任公司、新疆图木舒克质量技术监督局。本标准主要起草人：王延琴、杨伟华、唐淑荣、周大云、匡猛、马磊、蔡忠民、王星军、孟俊婷、方丹、韦京艳、徐双娇、周关印。- NY/T3030-—2016棉花中水溶性总糖含量的测定葱酮比色法1范围本标准规定了棉花中水溶性总糖含量测定的葱酮比色法。本标准适用于棉花中水溶性总糖含量的测定本标准方法的线性范围为0mg/mL～0.1mg/mL。本标准方法的定量限为0.003mg/mL。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6097棉纤维试验取样方法GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理棉花中的水溶性糖在浓硫酸存在下与葱酮发生显色反应，产生蓝绿色化合物，在波长575nm处测定吸光度，吸光度值与总糖含量成正比，根据标准工作曲线所得的回归方程，计算出糖含量。4试剂和材料除非另有说明，仅使用分析纯试剂，水为GB/T6682规定的三级水。4.1硫酸（HzSO4）：密度1.84g/mL。4.2葡萄糖标准品（C.H12O）：含量大于99.5%。4.3葡萄糖标准溶液Lp(C,H12O。）=1mg/mL：称取葡萄糖标准品0.01g（精确到0.1mg），加少量水溶解并稀释定容至100mL。4.4硫酸一葱酮指示剂：称取0.2g葱酮（精确到1mg），加100mL浓硫酸溶解，现用现配。5仪器5.1分光光度计。5.2分析天平：感量士0.0001g、感量士0.001g5.3恒温水浴振荡器。6取样6.1取样步骤6.1.1按GB/T6097的规定抽取实验室样品，风干，放人聚乙烯塑料包装袋内密封。6.1.2从实验室样品中随机抽取不少于150g的试验样品，将其中的非棉纤维去除，充分混匀。7试样的制备称取1g试样（精确到0.001g)3份，分别置于100mL具塞容器中，加水50mL，用玻璃棒反复挤压至棉纤维完全浸湿，盖紧容器盖，沸水浴中震荡加热60min，取出冷却后加0.1g活性炭，摇匀，脱色1 NY/T3030—201630min后过滤，加水定容至50mL备用。8分析步骤8.1标准曲线的制订分别吸取0mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL葡萄糖标准溶液（4.3）至50mL容量瓶中用水定容至刻度，摇匀。浓度分别为0ug/mL、10ug/mL、20ug/mL、40ug/mL、60μg/mL、80ug/mL、100ug/mL。准确吸取上述标准葡萄糖溶液1mL加人10mL具塞比色管中，每一试管加人5mL硫酸一葱酮指试剂（4.4），盖盖震荡，使之完全混合。在沸水中震荡加热10min，取出后于自来水中冷却。20min后，在分光光度计上，以含葡萄糖0mL的试管作对照，在波长575nm处测定吸光度值。以葡萄糖含量为横坐标、吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，或计算回归方程。可溶性总糖以葡萄糖(CsH12O）的体积分数C计，按式（1)计算。(1)C= aA+b式中：C——可溶性总糖浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；A——吸光度值。8.2测定准确吸取1mL试样（7）于10mL具塞试管中，加人5mL硫酸一葱酮指试剂，盖盖震荡，使之完全混合。在沸水浴中加热10min，在自来水中冷却至室温。20min后，在波长575nm处测定溶液的吸光度。根据标准曲线或回归方程计算相应的糖浓度。9结果计算含糖量按式(2)计算。W= 50×C×100(2)m式中：W——试样含糖量，单位为毫克每克(mg/g)；m——试样质量，单位为克(g)。取3次测定结果的算术平均值为测定结果，计算结果保留小数点后两位10精密度本标准方法的重复性标准偏差（s)为0.04。2 900/中华人民共和国农业行业标准棉花中水溶性总糖含量的测定葱酮比色法NY/T3030-2016***中国农业出版社出版（北京市朝阳区麦子店街18号楼）（邮政编码：100125网址：)北京昌平环球印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销***开本880mmX1230mm1/16印张0.5字数10千字2017年3月第1版20