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PCR 上岗证培训——历年考试知识点汇总 在我国新冠病毒疫情防控进入常态化的今天，核酸检测也越来越 普及越来越重要。6 月 8 日，国家卫健委发布了《关于加快推进新冠病 毒核酸检测的实施意见》，文件提出：二级以上医院应具备开展新冠 病毒核酸检测能力。 这就意味着全国大量医疗机构需建设 PCR 实验室。那么建设 PCR 实验室过程中最主要一点就是人员资质培训，实验室成员必须经过相 关培训并通过考核。现将历年理论考试知识点总结如下，供大家参考。 Q PCR 实验室建设、认证审核依据 ：A 《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法 》 （卫办 医政发 〔2010〕194 号）、《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》 Q 临床基因扩增检验实验室技术审核流程包括 ：A 申报、资料审核、现场验收、整改、通知审核结果。 Q 临床基因扩增实验中质量保证：A 室内质控 （重复性）和室间质评（准确度）。 Q PCR 技术的发明人是：A Kary Mullis。 Q 核酸包括两种类型 ：A 脱氧核糖核酸 （ATCG ）和核糖核酸 （AUCG ）。 Q 根据遗传中心法则，遗传信息的流动方向为 A DNA⇔RNA⇒蛋白质。 Q 临床基因扩增检验实验室一般包括四个分区：A 试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。 Q 核酸样品含量可根据（ ）处波长的吸光度算出。A 260nm Q 核酸样品纯度可根据（ ）处波长的吸光度比值算出。A 260/280nm Q cfDNA 是指 A 细胞游离 DNA ，ctDNA 是指循环肿瘤 DNA。 Q:PCR 检测用的试剂应当 A: 经国家药监局批准。 Q:医疗废物垃圾袋结扎采用 A: “鹅口颈”套扎结扎。 Q:锐器盒容积达到总体积的（ ）时需要更换。A: 3/4 Q:PCR 中，全血样本采集一般 A: 使用 EDTA 或枸橼酸盐抗凝 ，不使用肝素抗凝。 Q:Taqman 探针两端标记有 A: 荧光基团和淬灭基团。 Q:新冠病毒核酸检测应该 A: 在Ⅱ级生物安全实验室开展，同时采用生物安全Ⅲ级实验室的个 人防护。 Q:PCR 基本反应过程包括 A: 变性、退火、延伸。 Q:核酸的基本结构单位是：A: 核苷酸，其组成包括碱基、核糖或脱氧核糖和磷酸。 Q:DNA 双链中 A: 碱基 A-T 之间以两个氢键相连，G-C 以三个氢键相连。 Q:PCR 试剂盒中 A: 加入尿苷糖基酶（UNG ）具有防“污染”作用。 DNA 变性是指在物理或化学因素的作用下，导致两条 DNA 链之 间的氢键断裂，而核酸分子中其他共价键不受影响。 自制室内质控品时，应对质控品的均匀性和稳定性进行评价。 PCR 的测定点在 PCR 的指数扩增期 ，非平台期。 临床检验中的随机误差通常表现为质控物测定结果的 SD 增大。 核酸溶于水 ，不溶于乙醇等有机溶剂。 核酸的解链温度 （Tm ）与 G+C 含量有关 ，G+C 含量愈大 ，Tm 愈 高。 以次氯酸为主要成分的清洁剂在配制后 24 小时内使用。 质量管理体系要素包括质量方针、质量目标和质量指标。 核酸的复制是由 5’-3’方向进行。 DNA 变性的本质是双链间氢键的断裂。 Q:核酸提取纯化中，RNase 潜在污染源是：A: 实验室环境、实验用品如吸头、离心管等、实验人员的手。 Q:生物安全水平的级别共分为 A: 四个等级。 Q:PCR 出现基线漂移的可能原因有：A: 蒸发、探针水解、相邻荧光通道干扰等。 Q:常用 RNase 抑制剂是 A: DEPC （焦碳酸二乙酯）。 Q:Sanger 测序体系与 PCR 反应体系的主要区别是 A: 前者含有：ddNTP Q:mRNA 约占总 RNA 的 A: 5% Q:核酸检测对标本采集容器的要求是：A: