SN_T 4868-2017寡鬃实蝇（非中国种）检疫鉴定方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 4868—2017寡实蝇（非中国种）检疫鉴定方法Detection and identification of Dacus spp.(non-Chinese)2018-03-01实施2017-07-21发布中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局制涂层意真伤 SN/T 4868—2017言前本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国海南出人境检验检疫局、华南农业大学。本标准主要起草人：赵菊鹏、蔡波、马新华、武目涛、陆永跃、梁帆、马骏、林明光。T SN/T 4868—2017寡鬃实蝇（非中国种）检疫鉴定方法1范围本标准规定了寡繁实蝇（非中国种）Dacusspp.（non-Chinese)的检疫鉴定方法。本标准适用于出人境植物检疫中寡繁实蝇（非中国种）的检疫鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T1156进出境瓜果检疫规程SN/T1847寡毛实蝇类害虫分类学术语SN/T2029实蝇监测方法SN/T 24555进出境水果检验检疫规程3寡繁实蝇（非中国种）的基本信息学名：DacusFabricius1805。分类地位：双翅目（Diptera），实蝇科（Tephritidae），寡鬃实蝇亚科（Dacinae），寡繁实蝇族（Dacini）。传播途径：成虫可通过飞行进行短距离扩散传播，主要以幼虫随被害果实作远距离传播，其卵也可随果实传播，围蛹则可随果实的包装物和运输工具或寄主植物所带土壤传播。寡鬃实蝇属DacusFabricius原产于非洲热带地区，极少数分布于亚洲和大洋洲热带和亚热带地区，目前已知241种，其中中国分布10种（参见附录A中表A.1）。4方法原理根据寡实蝇（非中国种)在果实上的危害状，获取幼虫、蛹或成虫，如是幼虫或蛹则应饲养至成虫后制作成标本，置于显微镜下观察，依据形态特征判定是否为寡实蝇属非中国种。5器材和试剂5.1器材体视显微镜、干燥箱、冰箱、养虫箱、小型干燥器、防虫网罩、玻璃棉、养虫杯、载玻片、盖玻片、解部刀、解剖针、酒精灯、温湿度计、量筒（50mL、200mL）、烧杯（200mL、500mL）、白瓷盘（大号、小号）、昆虫还软器。5.2试剂10%氢氧化钠（或10%氢氧化钾）溶液、封片胶、苯酚、二甲苯、75%乙醇、丙三醇、水合三氯乙醛、阿拉伯树胶粉、蒸馏水。所用试剂均为分析纯。1 SN/T 4868-20175.3试剂配制5.3.110%氢氧化钠（或10%氢氧化钾）溶液的配制称取氢氧化钠（或氢氧化钾）10g置于200mL烧杯中，加人约80mL的蒸馏水，搅拌溶解后再加蒸馏水定容至100mL。5.3.2封片胶的配制称取阿拉伯树胶粉30g于烧杯中，加人50mL蒸馏水，置于40℃～50℃的水浴中加热。溶解后，加人200g水合三氯乙醛及20mL丙三醇，置于55℃～60℃的干燥箱内。一天后，用玻璃棉过滤（过滤在55℃～60℃干燥箱内进行）。5.3.3保存液的配制量取75%乙醇100mL，加人1mL丙三醇。6现场检疫与饲养6.1现场检疫仔细检查果实表面有无产卵刻点或产卵痕迹，或果实是否有腐软的现象，必要时剖果检查是否有状幼虫。将怀疑带虫的果实进行饲养观察。6.2饲养6.2.1卵或幼虫饲养将经6.1检查获得带有卵或幼虫的寄主果实放在小号白瓷盘里，然后将小号白瓷盘放在装有自来水的大号白瓷盘内，再用防虫网罩盖住小号白瓷盘，罩的下方边缘浸没于大号白瓷盘内的水中，置于温度为22℃～28℃，相对湿度为50%～90%的环境中饲养5d～10d至幼虫老熟。6.2.2蛹饲养取一盛有半干湿(含水量约5%）洁净细沙的养虫杯，将老熟幼虫置于细沙表面，幼虫将钻入沙中化，约1d后形成围蛹，然后置于养虫箱中，在温度为22℃～28℃，相对湿度为50%～90%条件下饲养，直至成虫羽化。6.2.3成虫饲养成虫羽化后，悬挂相应寄主果实切片于养虫箱内供其取食，待成虫斑纹的色泽和大小稳定后（约需5d），收集成虫并置于冰箱冷冻层0.5h～1h杀死。6.3标本制备6.3.1成虫标本制备如果成虫虫体已干硬，在制备标本前用昆虫还软器进行软化处理，虫体软化后制成针插标本。6.3.2成虫外生殖器玻片标本制备用解剖刀取成虫标本腹部，置于10%氢氧化钠（或10%氢氧化钾）溶液中，浸泡12h（或煮沸3min）2 SN/T4868—2017后取出：用蒸馏水洗净，在体视显微镜下，用解部针挑取阳茎或产卵器，滴人封片胶，制成玻片标本。7实验室鉴定7.1实蝇科Tephritidae的主要形态特